概述:有機硅生物打印
該協(xié)議是生物打印有機硅的分步指南。有機硅是由聚合硅氧烷組成的一類彈性體,其特點是耐久性高、毒性低、密封能力強、熱穩(wěn)定性好。這些特性使有機硅成為一種有吸引力的材料,適用于基于細胞的應(yīng)用,從芯片上的器官到植入物。有機硅是一種半透明、雙組分、不流動的配方,具有良好的機械性能,可成功生物打印 3D 結(jié)構(gòu)。
材料
有機 硅A部分和B部分
離心管 (15 mL)
1mL 移液器 + 移液器吸頭
注射器(5 mL 或 10 mL))
注射器蓋
錐形針頭,金屬或塑料
金屬刮刀
方法
將 15 克硅膠 – A 部分稱取到 50mL 離心管中。
向該試管中加入 1.5 mL 硅膠 – B 部分,然后用金屬刮刀充分混合。
將這種混合物加入注射器中,然后蓋上蓋子。
注意:由于其高粘度,硅膠 - A 部分可以通過用刮刀舀取并轉(zhuǎn)移到注射器筒中來裝載。
準備用于離心的配重。稱量注射器和硅膠,然后填充一個單獨的 15mL 錐形管,使其在加蓋時與注射器和硅膠的質(zhì)量相同。
請注意: 不平衡的離心機可能會對設(shè)備造成傷害或損壞。確保樣品在離心前得到適當?shù)钠胶狻?/p>
將注射器以 2000g 離心,將所有材料推到注射器的前部并去除滯留的氣泡。
注射器可以放置在標準的 15mL 錐形管支架內(nèi),使法蘭懸掛在邊緣。
將注射器硅膠柱塞添加到注射器的后部,使其保持側(cè)向,同時滑動到硅膠的背面,然后用刮刀旋轉(zhuǎn)到位。
固定所需的吸頭,然后將注射器裝入擠出機
將壓力設(shè)置為 50 PSI,并在擦去擠出的硅膠之前擠出少量硅膠以灌注針頭。
將打印承印物固定到打印機底板上。
注意:如果打印后需要高壓滅菌或加熱固化,請確保選擇與所需溫度相容的基材。
將噴嘴和注射器系統(tǒng)裝入打印機的擠出機。
校準擠出機,然后加載打印文件或打開實驗并按打印開始。
如果材料流或初始層沉積出現(xiàn)問題,請觀察打印件。
完成后,取下印刷基材,放入 50C 烘箱中過夜,然后高壓滅菌滅菌。
注意:確保所選的打印基材與固化和高壓滅菌所需的較高溫度兼容。
打印設(shè)置
軌距 | 噴嘴內(nèi)徑 (mm) | 層高 (mm) | 速度 (mm/s) | 壓力 (PSI) | 打印溫度 (°C) |
25G 錐形 | 0.28 | 0.35 | 4 | 50 | 室溫 |
故障排除:有機硅生物打印
為確保打印性能的一致性,請務(wù)必在打印當天混合硅膠 A + B 部分。一旦混合,有機硅將開始交聯(lián),其材料特性將隨著時間的推移而改變。
混合硅膠后不要重復(fù)使用離心管,先前固化的硅膠碎片會導(dǎo)致噴嘴堵塞。
使用移液器更容易地轉(zhuǎn)移硅膠部件 B。
通過硅膠結(jié)構(gòu)進行成像將很困難,如果需要對樣品進行可視化,請務(wù)必離開或創(chuàng)建窗口。