MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，化學(xué)名稱： 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍(lán)。是一種黃顏色的染料。MTT比色法，是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。

操作步驟
1.收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測細(xì)胞調(diào)密度1000- 10000 /孔。
2.一定條件培養(yǎng)細(xì)胞適當(dāng)時(shí)間，至細(xì)胞單層鋪滿96孔平底板,加入濃度梯度的藥物。
3.適當(dāng)條件培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間，倒置顯微鏡下觀察。
4.每孔加入10ul MTT溶液，繼續(xù)培養(yǎng)1-4h。若藥物與MTT能夠反應(yīng)，可先離心后棄去培養(yǎng)液，小心用PBS沖2-3遍后，再加入含MTT的培養(yǎng)液。
5.終止培養(yǎng)，小心吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液。
6.每孔加入100ul二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值。
活力計(jì)算：
細(xì)胞活力（％）=[A(加藥)-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）]×100
A（加藥）：具有細(xì)胞、MTT溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培養(yǎng)基和MTT溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度
A（0加藥）：具有細(xì)胞、MTT溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
細(xì)胞活力：細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力
應(yīng)用范圍
1.抗腫瘤藥物篩選
2.細(xì)胞毒性試驗(yàn)
3.腫瘤放射敏感性測定
服務(wù)期限
1-2周。