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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> 腺病毒包裝
貨物所在地:上海上海市
更新時(shí)間:2024-11-07 21:00:07
有效期:2024年11月7日 -- 2025年5月7日
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腺病毒(Adenovirus)是一種沒有包膜的直徑為70~90 nm的病毒顆粒,為線狀雙鏈DNA分子,約含35000 bp,兩端各有長約100 bp的反向重復(fù)序列。
腺病毒為5型血清型腺病毒,缺失了腺病毒的早期表達(dá)基因序列E1區(qū)和E3區(qū)。E1是腺病毒復(fù)制所必須的,E1的缺失使其不能自身復(fù)制,只能依靠包裝細(xì)胞如HEK293細(xì)胞提供的反式互補(bǔ)進(jìn)行復(fù)制擴(kuò)增,以此保證腺病毒的安全性。E3基因表達(dá)的蛋白能對抗宿主的抗病毒防御系統(tǒng),E3區(qū)的去除能減少宿主的體內(nèi)免疫反應(yīng)。
腺病毒包裝采用的是AdMax系統(tǒng),通過Cre-loxp重組酶,使共轉(zhuǎn)染到HEK293細(xì)胞中的腺病毒載體穿梭質(zhì)粒和骨架質(zhì)粒(腺病毒基因組質(zhì)粒)在重組酶的作用下產(chǎn)生重組腺病毒,獲得的病毒滴度更高,其病毒滴度可以達(dá)到1×10^12pfu/ml 。
腺病毒載體有CMV、mCMV、CAG、PGK、UbC、EF1a、等多種啟動子可供選擇;而且還有EGFP、ZsGreen、tdTomato、mCherry、EYFP等多種熒光標(biāo)記蛋白可供選擇。
客戶須知
1. 需客戶提供相關(guān)基因信息(基因ID、名稱、序列等)
提供結(jié)果
1. 提供完整的實(shí)驗(yàn)流程報(bào)告、測序文件、實(shí)驗(yàn)圖片、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)等。
2. 提供腺病毒感染各類細(xì)胞的相關(guān)實(shí)驗(yàn),為您提供全面的實(shí)驗(yàn)服務(wù),詳情請咨詢技術(shù)支持.
實(shí)驗(yàn)流程
1. 目的基因獲取。
2. 構(gòu)建腺病毒表達(dá)載體。
3. 針對目的基因設(shè)計(jì)合成siRNA,進(jìn)行靶篩。
4. 構(gòu)建腺病毒shRNA載體。
5. 線性化腺病毒載體。
6. 轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞。
7. 收集細(xì)胞裂解液。
8. 感染HEK293細(xì)胞,放大培養(yǎng)重組腺病毒。
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