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touchdown PCR，即降落PCR，可以選定一個(gè)溫度范圍，如50——35，每個(gè)溫度2循環(huán)，然后在50度15循環(huán)。其原理是，隨著退火溫度的降低，特異性逐步降低，但特異性條帶在溫度較高時(shí)已經(jīng)擴(kuò)增出來(lái)，其濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)非特異性條帶，隨著退火溫度的降低，特異性條帶優(yōu)先被擴(kuò)增。

降落PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)

反硝化作用是氮素循環(huán)中的一個(gè)重要生物過(guò)程，在整個(gè)氮循環(huán)中占有重要地位。隨著對(duì)反硝化作用認(rèn)識(shí)的深入，反硝化細(xì)菌也成為研究焦點(diǎn)。反硝化微生物是一種生理類群，廣泛分布于水體、淤泥、土壤等自然環(huán)境中。長(zhǎng)期施肥對(duì)稻田土壤反硝化作用有重要影響，化肥尤其是氮肥的大量投入，促進(jìn)了反硝化作用，提高了N₂O的排放量。以反硝化過(guò)程中的關(guān)鍵功能基因 –亞硝酸還原酶編碼基因（nirK、nirS）為分子標(biāo)記，探討施肥對(duì)反硝化菌群落多樣性的影響，有助于提高稻田系統(tǒng)氮素利用率，減少溫室氣體排放和環(huán)境污染，為稻田生產(chǎn)力可持續(xù)性發(fā)展提供重要理論依據(jù)。

利用分子生物學(xué)技術(shù)，研究通過(guò)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物，采用降落式 PCR擴(kuò)增目的基因，研究不同施肥處理對(duì)水稻土亞硝酸還原酶基因nirK、nirS多樣性的影響。

客戶需知：

1、請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料，或直接提供純化好的總RNA或DNA（大于5ug/樣本）。

2、詳細(xì)背景資料：DNA/RNA來(lái)源，豐度。

結(jié)果提供：

1、實(shí)驗(yàn)詳細(xì)步驟，和相關(guān)數(shù)據(jù)。

2、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）。

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毓秀生物科技（上海）有限公司

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