熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(Florescence In-Situ Hybridization簡稱FISH)是一種利用非放射性的熒光信號(hào)對原位雜交樣本進(jìn)行檢測的技術(shù)
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測應(yīng)用在醫(yī)療行業(yè)：
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(Florescence In-Situ Hybridization簡稱FISH)是一種利用非放射性的熒光信號(hào)對原位雜交樣本進(jìn)行檢測的技術(shù)。它將熒光信號(hào)的高靈敏度、安全性，熒光信號(hào)的直觀性和原位雜交的高準(zhǔn)確性結(jié)合起來，通過熒光標(biāo)記的DNA探針與待測樣本的DNA進(jìn)行原位雜交，在熒光顯微鏡下對熒光信號(hào)進(jìn)行辨別和計(jì)數(shù)，從而對染色體或基因異常的細(xì)胞、組織樣本進(jìn)行檢測和診斷，為各種基因相關(guān)疾病的分型、預(yù)前和預(yù)后提供準(zhǔn)確的依據(jù)。自20世紀(jì)80年代末，Pinkel和Heiles將FISH技術(shù)引入染色體檢測領(lǐng)域后，F(xiàn)ISH技術(shù)就在臨床診斷及科研工作中得到了廣泛的運(yùn)用，顯示出與一些傳統(tǒng)技術(shù)相比的明顯優(yōu)勢。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測與傳統(tǒng)的免疫組織化學(xué)法（IHC）相比，F(xiàn)ISH具有良好的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。目前免疫組織化學(xué)法正廣泛應(yīng)用于腫瘤等多個(gè)領(lǐng)域的臨床診斷。免疫組化的檢測對象是疾病相關(guān)的蛋白。由于蛋白的表達(dá)和本身的構(gòu)象受各種因素的影響很大（例如酸、堿和變性劑），檢測條件的穩(wěn)定性對檢測結(jié)果至關(guān)重要。此外，免疫組化檢測結(jié)果的判斷依賴于檢測者對顯色結(jié)果的主觀判斷，對于一些弱陽性的結(jié)果，不同的檢測者容易產(chǎn)生分歧。上述的因素都可能影響醫(yī)生對病情的終診斷。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測檢測的對象是細(xì)胞中的DNA，致密的雙螺旋結(jié)構(gòu)使DNA可以歷經(jīng)千百萬年而依然保持良好，其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，不易被環(huán)境條件影響，為熒光原位雜交技術(shù)的穩(wěn)定提供了良好的基礎(chǔ)。此外，熒光原位雜交結(jié)果的判定借助于對熒光的顏色判斷和信號(hào)計(jì)數(shù)，客觀地量化了檢測地結(jié)果。如果借助于相應(yīng)的FISH操作系統(tǒng)（例如Abbott-Vysis公司的Hybrit雜交儀和VP2000樣本預(yù)處理系統(tǒng)）和染色體成像系統(tǒng)（例如AI公司的CytoVision）就能實(shí)現(xiàn)整個(gè)FISH操作的自動(dòng)化，大限度的降低操作者和檢測者的主觀因素，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。
PCR由于靈敏度高，操作簡便快捷是近年來應(yīng)用比較多的基因診斷技術(shù)，但PCR診斷技術(shù)的假陰性和假陽性的比例較高，對同一樣本也只能作一次分析，不能重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。隨著探針技術(shù)的不斷發(fā)展，F(xiàn)ISH目前的靈敏度已經(jīng)接近或達(dá)到PCR的水平，并能很好彌補(bǔ)PCR技術(shù)的局限。熒光原位雜交技術(shù)fish檢測不僅有極低的假陽性、假陰性的比例（以Abbott-Vysis的產(chǎn)前診斷探針為例，29,000例的使用結(jié)果證實(shí)正確率高達(dá)99.9％），還能對同一樣本進(jìn)行多次的FISH操作以及利用不同顏色的熒光探針一次檢測多個(gè)染色體或基因的異常，大大節(jié)省了檢測的時(shí)間。此外，通過FISH可以對染色體或特定基因的數(shù)目異常，特定片斷的缺失、易位和重排進(jìn)行診斷研究。
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用在產(chǎn)前及植入前、腫瘤的預(yù)前和預(yù)后以及血液類疾病的診斷分型領(lǐng)域。
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