應(yīng)用范圍
基礎(chǔ)生物學(xué)研究:用于研究miRNA在生物體內(nèi)的表達(dá)模式、調(diào)控機(jī)制及其對(duì)細(xì)胞功能的影響。
疾病診斷與預(yù)后:miRNA表達(dá)譜與多種疾病狀態(tài)相關(guān),包括癌癥、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等。通過(guò)熒光定量檢測(cè)miRNA,有助于疾病的早期診斷、預(yù)后判斷及治療效果監(jiān)測(cè)。
藥物研發(fā):評(píng)估藥物對(duì)miRNA表達(dá)的影響,為新藥開(kāi)發(fā)提供分子標(biāo)志物和潛在治療靶點(diǎn)。
步驟
RNA提取:使用專用的RNA提取試劑盒從細(xì)胞或組織樣本中提取miRNA。
miRNA逆轉(zhuǎn)錄:利用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將提取的miRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。
qPCR擴(kuò)增:使用特異的miRNA引物和熒光探針進(jìn)行PCR擴(kuò)增,同時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的變化。
數(shù)據(jù)分析:根據(jù)熒光信號(hào)的強(qiáng)度和變化,計(jì)算miRNA的表達(dá)量,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
分析方法
相對(duì)定量法:通過(guò)比較目標(biāo)miRNA與內(nèi)參基因(如U6或RNU48)的表達(dá)量,確定目標(biāo)miRNA的相對(duì)表達(dá)水平。這種方法適用于比較不同樣本間miRNA的表達(dá)差異。
絕對(duì)定量法:使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣本的熒光信號(hào)強(qiáng)度計(jì)算miRNA的絕對(duì)數(shù)量。這種方法能夠提供更精確的miRNA表達(dá)量信息。
miRNA熒光定量檢測(cè)服務(wù)是一種高效、準(zhǔn)確的miRNA分析方法,廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)生物學(xué)研究、疾病診斷和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。通過(guò)熒光信號(hào)的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和定量分析,能夠深入了解miRNA在生物體內(nèi)的功能和調(diào)控機(jī)制,為相關(guān)研究和應(yīng)用提供有力支持。