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當(dāng)前位置:Bio-Techne>>技術(shù)文章>>單細(xì)胞柔性分選系統(tǒng)Pala vs FACS, 勝!
目前,包括單抗、雙抗、多抗治療性蛋白藥物已成為生物制藥市場的主導(dǎo)產(chǎn)品類別之一。在制備這些治療性蛋白藥物時(shí),單細(xì)胞克隆技術(shù)的應(yīng)用對于確保產(chǎn)品質(zhì)量的一致性和避免人為干預(yù)至關(guān)重要。通過有限稀釋進(jìn)行單細(xì)胞篩選耗時(shí)且低效,傳統(tǒng)FACS技術(shù)昂貴的設(shè)備及人員培訓(xùn)又筑起了一道高門檻。
阿斯利康對比了傳統(tǒng)FACS與Namocell單細(xì)胞分離儀Pala, 結(jié)果表明與FACS衍生細(xì)胞系相比,Pala具有相當(dāng)甚至更優(yōu)的細(xì)胞生長和生產(chǎn)能力,且操作簡單,運(yùn)行/維護(hù)成本低,可以作為替代FACS更具性價(jià)比,高效便捷的選擇。
01
試驗(yàn)方法
1
將轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記,通過FACS和單細(xì)胞分離儀Pala將單細(xì)胞分離至384孔板中
2
對分配后的細(xì)胞進(jìn)行成像和克隆生長評估,以確定單細(xì)胞克隆的成功率。
3
通過小規(guī)模補(bǔ)料分批培養(yǎng)評估不同克隆來源的細(xì)胞系的生長特性和生產(chǎn)能力。
02
研究結(jié)果
1
Pala 的單細(xì)胞分離效率高達(dá)96.3%,細(xì)胞活率高,生長2周后無空孔
2
在易于表達(dá)的單克隆抗體和不易于表達(dá)的非單克隆抗體模型中,對于生長狀況和產(chǎn)量滴度來說,F(xiàn)ACS和Pala無明顯差異。
3
在兩種模型中,無論是滴度、Qp、分裂速率、最大細(xì)胞密度、活率均無明顯差異。
4
Pala與FACS相比,機(jī)器小巧輕便可放置在安全柜中,易于無菌操作。開機(jī)校準(zhǔn)時(shí)間短、關(guān)機(jī)流程簡單迅速、鞘液消耗更少、耗材成本低、易于終端用戶操作、儀器維護(hù)成本更低。
單細(xì)胞分離儀Pala結(jié)合微流控技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)和液滴分配技術(shù),在<2psi的低壓下對細(xì)胞進(jìn)行分選,可分別在1分鐘和6分鐘內(nèi)將細(xì)胞分選到96或384孔板中。在節(jié)省大量分選時(shí)間的同時(shí)獲得健康且有活力的細(xì)胞。
Pala保證了較高的單細(xì)胞效率,單細(xì)胞入孔率超過90%。自動(dòng)化設(shè)計(jì)使得操作簡單直觀,不需要專門的操作人員和大量的應(yīng)用培訓(xùn)。小巧輕便的設(shè)計(jì)允許其可以在超凈臺(tái)內(nèi)完成操作,一次性細(xì)胞芯片避免了樣本間的交叉污染。
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