多克隆抗體，針對含有乙?；嚢彼?2（H2BK12ac）的組蛋白H2B區(qū)域，使用KLH偶聯(lián)的合成肽免疫制備。

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience銷售產(chǎn)品Anti-H2BK15ac多克隆抗體。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Anti-H2BK15ac多克隆抗體：

單克隆性：多克隆  

宿主物種/表達系統(tǒng)：兔  

純化方法：親和純化  

形式：水性緩沖溶液  

配方：含有0.05%疊氮化物和0.05% ProClin 300的PBS  

濃度：50 ?g/61 ?l  

免疫原：合成肽  

儲存/穩(wěn)定性  

儲存于–80°C，最長可達2年。分裝以避免反復凍融循環(huán)。分裝樣本可在–20°C下至少儲存一個月。

針對H2BK12ac的抗體的ChIP結(jié)果  

使用人類HeLa細胞、針對H2BK12ac的抗體（產(chǎn)品編號25232）以及優(yōu)化的qPCR引物對進行染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）實驗。實驗使用了150萬細胞的剪切染色質(zhì)。實驗中使用了0.5、1、2和5 ?g的抗體梯度，并以IgG（1 ?g/IP）作為陰性免疫沉淀對照。qPCR使用特異性引物針對GAPDH和ACTB基因啟動子上游約1 kb的區(qū)域（作為陽性對照）以及非活性MYOD1基因的編碼區(qū)和Sat2衛(wèi)星重復序列（作為陰性對照）。圖1顯示了回收率，以輸入量的百分比表示（免疫沉淀DNA相對于輸入DNA的相對量，經(jīng)qPCR分析后得出）。

針對H2BK12ac的抗體的ChIP-seq結(jié)果  

使用0.5 ?g針對H2BK12ac的抗體（產(chǎn)品編號25232），對150萬HeLaS3細胞的剪切染色質(zhì)進行ChIP實驗，如上所述。隨后，免疫沉淀DNA通過Illumina HiSeq進行分析。文庫制備、簇生成和測序均按照制造商的說明進行。51 bp標簽通過BWA算法與人類基因組比對。圖2顯示了整個序列的富集情況以及X染色體上1 Mb區(qū)域（圖2A和B）和7號染色體上ACTB基因周圍區(qū)域以及12號染色體上GAPDH基因周圍區(qū)域的基因組區(qū)域（圖2C和D）。用于ChIP-qPCR的擴增子位置用箭頭表示。

抗體效價測定  

為了測定抗體的效價，采用ELISA方法，使用針對H2BK12ac（產(chǎn)品編號25232）的抗體稀釋液在抗原包被的孔中進行檢測。所用抗原為含有感興趣組蛋白修飾的肽。通過繪制吸光度與抗體稀釋度的關系圖（圖3），估計抗體的效價為1:38,200。

針對H2BK12ac的抗體的交叉反應性測試  

為了測試針對H2BK12ac（產(chǎn)品編號25232）的抗體的交叉反應性，采用點樣分析法（Dot Blot），使用含有其他組蛋白修飾和未修飾H2B序列的肽。將100至0.2皮摩爾的相應肽點樣于膜上?？贵w稀釋度為1:5,000。圖4顯示該抗體對感興趣的修飾具有高特異性。

針對H2BK12ac的抗體的Western blot分析  

采用Western blot方法，對HeLa細胞的全細胞提取物（25 ?g，第1泳道）和組蛋白提取物（15 ?g，第2泳道）以及1 ?g的重組組蛋白H2A、H2B、H3和H4（分別對應第3、4、5和6泳道）進行檢測，使用針對H2BK12ac（產(chǎn)品編號25232）的抗體。抗體在含有5%脫脂奶粉的TBS-Tween中稀釋1:1,000。左側(cè)顯示了標記的分子量（以千道爾頓計）。

應用  

- ChIP/ChIP-seq（0.5 – 1 ?g/ChIP）  

- ELISA（1:1000）  

- 點樣分析（DB，1:5000）  

- Western blot（WB，1:1000）  

運輸溫度：–20°C或–80°C  

物種反應性：人  

注意事項：最終用戶應確定每次免疫沉淀的優(yōu)良抗體用量。我們建議測試1–5 ?g/IP。  

警告：避免反復凍融循環(huán)。  

科學分類：抗體  

監(jiān)管狀態(tài)：僅限研究使用

產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫：

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商，公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立，從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領域的創(chuàng)新解決方案，以推動新的藥物發(fā)現(xiàn)a。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學、CRISPR、細胞信號轉(zhuǎn)導等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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