組蛋白是真核細(xì)胞染色體蛋白部分的主要組成成分。它們富含精氨酸和賴氨酸，并且在進(jìn)化過程中高度保守。組蛋白將DNA緊密包裝成染色質(zhì)。每類核心組蛋白H2A、H2B、H3和H4各有兩個分子組裝在一起，并被146個堿基對的DNA包裹，形成一個八聚體核小體。組蛋白在轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA修復(fù)、DNA復(fù)制和染色體穩(wěn)定性中發(fā)揮核心作用。這些不同的功能是通過一系列復(fù)雜的翻譯后修飾建立的，這些修飾直接或間接改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)和DNA的可及性，從而促進(jìn)轉(zhuǎn)錄激活或抑制或其他核過程。

多克隆抗體，針對組蛋白H3，使用兩個KLH偶聯(lián)的合成肽免疫制備，這些肽分別包含H3蛋白中部和C末端的未修飾序列。

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BPS Bioscience銷售產(chǎn)品Anti-H3pan多克隆抗體。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Anti-H3pan多克隆抗體：

單克隆性：多克隆  

宿主物種/表達(dá)系統(tǒng)：兔  

純化方法：全血清  

形式：水性溶液  

配方：含有0.05%疊氮化物的全兔抗血清  

濃度：100 ?l  

免疫原：合成肽  

儲存/穩(wěn)定性  

儲存于–80°C，最長可達(dá)2年。分裝以避免反復(fù)凍融循環(huán)。分裝樣本可在–20°C下至少儲存一個月。

抗體效價測定  

為了測定抗體的效價，采用ELISA方法，使用針對H3pan（產(chǎn)品編號25235）的抗體稀釋液進(jìn)行檢測。通過繪制吸光度與抗體稀釋度的關(guān)系圖（圖1），估計抗體的效價為1:900,000。

針對H3pan的抗體的交叉反應(yīng)性測試  

采用點樣分析法（Dot Blot）測試針對H3pan（產(chǎn)品編號25235）的抗體與用于免疫兔子的肽以及其他包含H3不同修飾或未修飾序列的肽的交叉反應(yīng)性。將100至0.2皮摩爾的相應(yīng)肽點樣于膜上?？贵w稀釋度為1:1,000。圖2顯示該抗體對其中一種未修飾肽具有高特異性。

針對H3pan的抗體的Western blot分析  

使用針對H3pan（產(chǎn)品編號25235）的抗體對HeLa細(xì)胞的組蛋白提取物（15 ?g）進(jìn)行Western blot分析，抗體在含有5%脫脂奶粉的TBS-Tween中稀釋1:250（第1泳道）。第2泳道顯示了考馬斯亮藍(lán)染色的凝膠。左側(cè)標(biāo)記了目標(biāo)蛋白的位置；右側(cè)顯示了分子量標(biāo)記（以千道爾頓計）。

針對H3pan的抗體的ChIP結(jié)果  

使用人類HeLa細(xì)胞、針對H3pan的抗體（產(chǎn)品編號25235）以及優(yōu)化的qPCR引物對進(jìn)行染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）實驗。實驗使用了10,000個細(xì)胞的剪切染色質(zhì)。實驗中使用了1、5和10 ?l的抗體梯度，并以IgG（5 ?g/IP）作為陰性免疫沉淀對照。qPCR使用特異性引物針對GAPDH基因啟動子、MYOD基因以及異染色質(zhì)標(biāo)記Sat2。圖4顯示了回收率，以輸入量的百分比表示（免疫沉淀DNA相對于輸入DNA的相對量，經(jīng)qPCR分析后得出）。

應(yīng)用  

- ChIP（1 – 5 ?l/ChIP）  

- ELISA（1:100 – 1:1000）  

- 點樣分析（DB，1:1000）  

- Western blot（WB，1:250）  

運(yùn)輸溫度：–20°C或–80°C  

物種反應(yīng)性：人  

注意事項：最終用戶應(yīng)確定每次免疫沉淀的優(yōu)良抗體用量。我們建議測試1–5 ?g/IP。  

警告：避免反復(fù)凍融循環(huán)。  

科學(xué)分類：抗體  

監(jiān)管狀態(tài)：僅限研究使用

產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫：

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認(rèn)證的生命科學(xué)領(lǐng)域的供應(yīng)商，公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領(lǐng)域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立，從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領(lǐng)域的創(chuàng)新解決方案，以推動新的藥物發(fā)現(xiàn)a。公司主要關(guān)注的領(lǐng)域包括免疫療法、表觀遺傳學(xué)、CRISPR、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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