NEB可提供210多種內(nèi)切酶，其中有130多種內(nèi)切酶為重組酶?？寺〖爸亟M技術(shù)的運(yùn)用，使NEB能在提高內(nèi)切酶的純度及品質(zhì)的同時，極大地削減生產(chǎn)費(fèi)用，從而為用戶提供價格更合理、品質(zhì)更優(yōu)良的產(chǎn)品上海騰騫生物www.tqbio.net, ，

NEB可提供210多種內(nèi)切酶，其中有130多種內(nèi)切酶為重組酶?？寺〖爸亟M技術(shù)的運(yùn)用，使NEB能在提高內(nèi)切酶的純度及品質(zhì)的同時，極大地削減生產(chǎn)費(fèi)用，從而為用戶提供價格更合理、品質(zhì)更優(yōu)良的產(chǎn)品

T4 DNA 連接酶

特性

■  高效連接粘性末端和平末端
■  T/A 克隆
■  dsDNA 切刻修復(fù)
■  構(gòu)建高豐度克隆文庫
■  RNA 和 DNA 的連接

概述

該酶催化雙鏈 DNA 或 RNA 上相鄰的 5?-磷酸末端和 3?-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能夠催化平齊末端或粘性末端之間的連接，還可以修復(fù)雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交雙鏈中的單鏈切刻。

來源

純化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。

反應(yīng)條件

1X T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM MgCl₂，10 mM DTT，1 mM ATP]。推薦 DNA 5? 末端濃度為 0.1-1.0 μM，16℃ 溫育。
熱失活：65℃ 10 分鐘。

質(zhì)保聲明

T4 DNA 連接酶經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測，確保該產(chǎn)品具有zui高的活性和純度。

單位定義（粘性末端活性單位）

1 單位指在 20 μl 1X T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液中，16℃ 反應(yīng)條件下，30 分鐘能使 50% 的經(jīng) HindⅢ 消化的λDNA 片段 [ 5? 端濃度為 0.12 μM（300 μg/ml）] 連接所需的酶量。

濃度

400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。

注意事項(xiàng)

與 E. coli DNA 連接酶需要 NAD+ 作輔因子不同，T4 DNA 連接酶的輔因子是 ATP。

稀釋后的 T4 DNA 連接酶應(yīng)于 -20℃、50% 甘油貯存緩沖液（稀釋緩沖液 A，NEB #B8001）中保存。如稀釋后馬上使用，也可用 1X T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液稀釋。

只要在反應(yīng)體系中補(bǔ)加 1 mM ATP，連接反應(yīng)就可以在 NEB 提供的四種限制性內(nèi)切酶緩沖液或在

T4 DNA 多聚核苷酸激酶反應(yīng)緩沖液中進(jìn)行。

 

連接酶
NEB#	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單價
M0202L	T4 DNA Ligase	100,000 units	3,029
M0202M	T4 DNA Ligase, high conc.	100,000 units	3,029
M0202S	T4 DNA Ligase	20,000 units	699
M0202T	T4 DNA Ligase, high conc.	20,000 units	699
M0202V	T4 DNA Ligase	10,000 units	349
M2200L	Quick Ligation Kit	150 rxns	4,569
M2200S	Quick Ligation Kit	30 rxns	1,009
M2200V	Quick Ligation Kit	15 rxns	509
M0367L	Blunt/TA Ligase Master Mix	250 rxns	4,569
M0367S	Blunt/TA Ligase Master Mix	50 rxns	1,149
M0370L	Instant Sticky-end Ligase Master Mix	250 rxns	4,569
M0370S	Instant Sticky-end Ligase Master Mix	50 rxns	1,149