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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化試劑盒>>氧化磷酸化系列>> 谷氨酸(Glu)微量法測(cè)試盒
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-03-14 14:37:52瀏覽次數(shù):343次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 |
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貨號(hào) | GOY-01S6531 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅用于科研 |
產(chǎn)品名稱:谷氨酸(Glu)微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào):GOY-01S6531
分類:氨基酸代謝系列
商品介紹:
Glu廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一,而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內(nèi)主要氨基來(lái)源之一。此外,Glu還是味精的主要有效成分,常用做食品添加劑以及香料。
測(cè)定原理
利用專用提取液提取,然后用顯色劑進(jìn)行顯色,顯色后在570nm下進(jìn)行測(cè)定。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
緩激肽B2受體抗體 胰島β細(xì)胞生長(zhǎng)因子Reg IIIα 抗體
β-乳球蛋白抗體 抑制劑抗體
0酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 一種腫瘤抑制基因抗體(N端)
丁酰膽堿酯酶單克隆抗體 一種腫瘤抑制基因抗體(C端)
BADH2抗體(水稻) 一氧化氮合成酶-3(內(nèi)皮型)抗體
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谷氨酸(Glu)微量法測(cè)試盒骨骼肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL
黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL Fluo-3,五銨鹽1mg
黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含 TPA5mL Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL
滑膜細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )20μL
間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化生長(zhǎng)因子5mL EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
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