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AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL供應(yīng)

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-02-12 08:48:13瀏覽次數(shù):737次

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AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL供應(yīng)運輸及保存 干冰運輸、-80℃保存,避免反復(fù)凍融,有效期半年。

AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL供應(yīng)產(chǎn)品及特點:

本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達 107CFU/μg。 DH10Bac 細胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復(fù)制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位點和 lac Zα-互補因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含慶大霉素抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍白斑篩選。菌株基因型為:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL供應(yīng)規(guī)格及成分:

AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL供應(yīng)使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以 100 μL 感受態(tài)細胞為例。
3. 待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長情況決定去留。

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
BE(2)-M17(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
根瘤菌 Rhizobium sp.
大鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
猴菌
去甲斑蟊素規(guī)格:20mg/支;98%
大鼠卵巢顆粒細胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis
P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2pMSEx-3(pMSEx3)
pNL3.2.NF-kB-RE[NlucP NF-kB-RE Hygro]
pOZ-FH-C-puro(pOZFHCpuro)
pPD95.77-wVenus(pPD95.77wVenus)
pPLc28
pQCXIN X2/pSM2(CMV/TO) empty(pQCXINX2pSM2CMVTOempty) (w334-1)
pRB374
pRK2013(60908-5911)
pRSVgpt
pSF-pA-PromMCS-FLuc
pSLIK-Zeo(pSLIKZeo)
pSUMO(60908-6335y)
pTacNeo1.3
pTimer-1(pTimer1)
pTriEx-7(pTriEx7)
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL供應(yīng)苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Ni-Agarose Resin for 6x His-Tagged ProteinsNi瓊脂糖凝膠100ml國產(chǎn)gersion
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
戴爾根霉
人結(jié)腸細胞英文名稱:LOVO
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
哈茨木霉 Mesorhizobium huakuii

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