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一、ELISA實驗中血清的采集、處理和保存1、真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中。2、采血后室溫靜置1小時。3、將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下,可放置保存24-48小時;-20℃下,可放置保存1個月;-70℃下,可放置保存6個月。5、根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規(guī)方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧
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出現(xiàn)問題出現(xiàn)問題的原因解決辦法曲線OD值不正常試劑盒未回溫試劑盒回溫到25℃溫度控制不好控制正確溫度孵育時間不準確控制孵育時間洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增加洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干陽光直射,對著風直接吹避風避光酶標儀的波長錯誤酶標儀的波長450nm抗體的稀釋錯誤正確的稀釋抗體水質(zhì)問題用礦泉水代替白板洗滌液配制錯誤正確的配制洗滌液少加液體(抗體、酶標記物、A液、B液)正確的步驟加液體錯加液體無梯度標準品也污染換標準品點板OD值不正??刂茰囟葧r間在做一次人為點板/線性不好
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試劑,儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應用,兩者均有詳細的使用說明,嚴格遵照規(guī)定操作,必能得出準確的結(jié)果。一、標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液
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本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。然而,影響ELISA試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。ELISA試劑盒的操作方法雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘
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有證標準物質(zhì)和其它標準物質(zhì)在使用上有什么區(qū)別?
首先應明確,只有有證標準物質(zhì)提供的認定值或標準值才能夠用于校準、為其他物質(zhì)賦值以及測量正確度確認,并通過其使用來聲明測量結(jié)果的計量學溯源性。在我們的日常測量中,還會使用其它類型的標準物質(zhì),它們主要用于開展測量質(zhì)量控制、測量精密度確認等。有時,在缺少有證標準物質(zhì)的情況,也不得不使用這些標準物質(zhì)來開展校準等活動,但是應進一步評估這些標準物質(zhì)是否符合有證標準物質(zhì)的特征,或溯源性和量值不確定度水平能夠充分滿足測量結(jié)果溯源性和準確度要求。有證標準物質(zhì)的證書中,有時會提供一些額外的參考值或信息值,這些值通常 -
請根據(jù)您需要稱量的重量和容許誤差選擇合適的天平。如稱量少于10mg的產(chǎn)品,建議使用十萬分之一的分析天平。在購買產(chǎn)品時也請注意產(chǎn)品的重量能否滿足您的需求。一般采用增量法或減量法進行稱量,以下是一些建議供您參考:a.稱量前:建議將產(chǎn)品直立放置一段時間,使產(chǎn)品全部集中至底部,便于取用。尤其是粘稠狀物質(zhì),可以傾斜至與豎直方向呈45度,使產(chǎn)品集中在瓶底邊緣。如果當心瓶蓋上有粘附,可以在未打開瓶蓋前甩動瓶身,使產(chǎn)品集中至瓶底。b.粉末或晶體:建議采用增量法稱量,準備合適的干燥容器,歸零后將產(chǎn)品傾倒在容器內(nèi),
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對于化合物類產(chǎn)品,(標準品,小分子抑制劑,粉末類生化試劑等)我司保證所供產(chǎn)品質(zhì)量與我司所列標準相符。鑒于化學品的特殊性,賣方對未使用之前的產(chǎn)品質(zhì)量負責,對化學品的應用不負有任何責任與間接的責任。在保存使用方面常見問題如下:1關(guān)于儲存條件大部分的試劑產(chǎn)品是比較穩(wěn)定的,只要您嚴格按照產(chǎn)品包裝或者說明書上的儲存條件進行儲存,*可以保證其在有效期內(nèi)的正常使用。一般常見儲存條件有零下XX攝氏度,2-8攝氏度,常溫等。特別提醒,對于某些酶類制品,如果儲存條件是2-8攝氏度,不要儲存在零下,否則容易失活,對于
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常見慢性氣道疾病中大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物怎么用?指南告訴你
自從日本上世紀80年代發(fā)現(xiàn)大環(huán)內(nèi)酯類用于治療彌漫性泛細支氣管炎取得良好的效果后,大環(huán)內(nèi)酯類不依賴其抗菌作用的抗炎及免疫抑制效應就有了越來越多的研究,這對于常見的慢性呼吸系統(tǒng)疾病如慢性阻塞性疾病及支氣管擴張等有重要或潛在的價值。1.大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物[1]包括哪些?大環(huán)內(nèi)酯類按化學結(jié)構(gòu),常見的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素有:(1)12元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類,如酒霉素等;(2)14元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類,包括紅霉素、羅紅霉素、克拉霉素、地紅霉素等;(3)15元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類,以半合成的阿奇霉素為代表藥物;(4)16元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類