Bst DNA Polymerase?
鏈置換酶
◆產(chǎn)品說明
　　本產(chǎn)品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性與鏈置換活性，是一款自動從模板雙鏈DNA的氫鍵解離，然后后合成新DNA鏈的酶。由于其特性，耐熱性鏈置換DNA聚合酶無需DNA的雙鏈解離，即可在恒定溫度下合成DNA，且合成不受DNA二級結(jié)構(gòu)的抑制。

Bst DNA Polymerase?

鏈置換酶

 

 

◆產(chǎn)品說明

 

　　本產(chǎn)品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性與鏈置換活性，是一款自動從模板雙鏈DNA的氫鍵解離，然后后合成新DNA鏈的酶。由于其特性，耐熱性鏈置換DNA聚合酶無需DNA的雙鏈解離，即可在恒定溫度下合成DNA，且合成不受DNA二級結(jié)構(gòu)的抑制。

 

 

特點(diǎn)

 

●  具有5’→ 3’DNA聚合酶活性與鏈置換活性

●  可在恒定溫度下合成DNA

●  適用于合成GC含量高的DNA鏈

●  合成不受DNA二級結(jié)構(gòu)抑制

 

 

應(yīng)用

 

●  利用鏈置換活性的應(yīng)用（等溫基因擴(kuò)增法等）

 

 

理想反應(yīng)溫度	60°C～65°C
失活時間*1	80°C、5分鐘

*1 將酶原液直接熱變性時的失活溫度

 

 

來源	嗜熱脂肪芽孢桿菌
活性	8 units/μL
單位定義	1 unit指以小牛胸腺DNA為引物/模板，在65°C，30分鐘的條件下將10 nmol的dNTP摻入酸不溶性沉淀物的酶量。
儲存液成分	10 mmol/L Tris-HCl（pH 7.5）, 1 mmol/L DTT, 0.1% Tween 20, 0.1 mmol/L   EDTA, 50% 丙三醇
酶反應(yīng)條件	隨酶附帶10×的酶反應(yīng)緩沖液（0.5 mL×1）。如反應(yīng)總體積為50 μL，添加5 μL的酶反應(yīng)緩沖液

 

 

◆產(chǎn)品組成

 

Bst DNA Polymerase（1,600 units）

 

產(chǎn)品組分	容量	保存
Bst DNA Polymerase（8units/μL）	200微升×1	-20°C
10× Bst Reaction Buffer（80mmol/L Mg2+）	500微升×1	-20°C

 

 

◆應(yīng)用實(shí)例

 

實(shí)驗(yàn)案例1  LAMP法中的運(yùn)用

 

LAMP法 反應(yīng)條件

 

?

?	3.0% Agarose 21   TAE凝膠電泳   EtBr染色     M：Gene Ladder Wide 1   1：A 公司Bst DNA Polymerase   2：本公司Bst DNA Polymerase

 

Candidatus Liberibacter asiaticus DNA	1 × 106copies
FIP*	40pmol
BIP*	40pmol
F3 Primer*	5pmol
B3 Primer*	5pmol
Loop Primer F*	20pmol
Loop Primer B*	20pmol
dNTPs Mixture	1.4mM each
10 × Bst Reaction Buffer	2.5μL
Bst DNA Polymerase	8units
總計	25μL

 

反應(yīng)

 

65°C

60分鐘

 

*引物序列

 

FIP: 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3'

BIP: 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3'

F3 Primer: 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3'

B3 Primer: 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3'

Loop Primer F: 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3'

Loop Primer B: 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3'

 

 

實(shí)驗(yàn)案例2  RCA法評估Bst DNA Polymerase的耐熱性與理想反應(yīng)溫度

 

 

RCA法 反應(yīng)溶液組成

 

M13mp18 single strand DNA	40ng
Universal primer	50mM
dNTPs Mixture	1.4mM each
Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C)	20mM
KCl	10mM
(NH4)2SO4	10mM
MgSO4	8mM
Tween 20	0.10%
Betaine	0.8M
Bst DNA Polymerase	4units
總計	20μL

 

反應(yīng)條件

 

各個溫度下

30分鐘

 

結(jié)果

 

?

 

條帶

 

M：Gene Ladder Wide 1 

D：模板 DNA (M13mp8 single strand）

 

引物序列

 

5'-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3'

 

電泳條件

 

0.7% Agarose S/TAE凝膠電泳

EtBr染色

使用不含SDS的上樣緩沖液

 

備注

 

　　本實(shí)驗(yàn)為比較兩種Bst DNA Polymerase，使用相同的反應(yīng)液組成進(jìn)行反應(yīng)。在RCA法中使用各種酶配套的緩沖液時，須進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)探究反應(yīng)體系。

 

 

◆相關(guān)信息

 

備注

 

●  本產(chǎn)品為實(shí)驗(yàn)研究用試劑。不可作為醫(yī)藥品使用。

●  檢測柑橘黃龍病菌的LAMP引物組合是國立研究開發(fā)法人 農(nóng)業(yè)、食品產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究機(jī)

●  構(gòu)九州沖繩農(nóng)業(yè)研究中心靈活運(yùn)用先進(jìn)技術(shù)，在農(nóng)林水產(chǎn)研究高度化事業(yè)“抑制頑固性疾病柑橘綠化病傳播的技

●  術(shù)開發(fā)”中開發(fā)的產(chǎn)品。

 

許可

 

●  LAMP法由榮研化學(xué)株式會社持有專.利權(quán)。

 

 

◆產(chǎn)品列表

 

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝
311-07481	Bst DNA Polymerase	1600units

 

 

◆相關(guān)產(chǎn)品

 

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝
319-07281	Csa DNA Polymerase	1600units
319-07301	96-7 DNA Polymerase	1600units
312-07271	dNTPs Mixture（25mM each）	400微升

 

 

富士膠片和光（廣州）貿(mào)易有限公司是日本富士膠片和光純藥株式會社（FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation，以下稱"富士膠片和光"）在中國的子公司，主營富士膠片和光品牌試劑產(chǎn)品，囊括合成與材料、分析、培養(yǎng)、生命科學(xué)、藥品生產(chǎn)與品質(zhì)管理領(lǐng)域。和光純藥工業(yè)株式會社（前武田藥品工業(yè)株式會社）成立于1922年，2017年被富士膠片集團(tuán)全面收購而成為集團(tuán)成員之一。富士膠片和光是日本的試劑企業(yè)，也是優(yōu)質(zhì)的試劑供應(yīng)商，在美國、歐洲和中國都設(shè)有分公司。自成立以來，一直致力于高品質(zhì)的試劑生產(chǎn)與開發(fā)，并獲得ISO9001，ISO/IEC17025，ISO14000等（部分）多項(xiàng)認(rèn)證。

通過對本次收購，富士膠片集團(tuán)將充分發(fā)揮其在膠片領(lǐng)域積累的化學(xué)合成、納米、生產(chǎn)等技術(shù)，在醫(yī)療健康事業(yè)、高性能材料事業(yè)兩個核心業(yè)務(wù)中實(shí)現(xiàn)協(xié)同增效作用。尤其是醫(yī)療健康事業(yè)，在頗具市場潛力的再生醫(yī)學(xué)、生物制藥等領(lǐng)域都將產(chǎn)生巨大的協(xié)同增效作用。

富士膠片和光所供應(yīng)的FUJIFILM Wako品牌試劑產(chǎn)品超過50,000多種，涉及生命科學(xué)、分析化學(xué)、有機(jī)、無機(jī)化學(xué)、生物工程、高純度及認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)品、食品、醫(yī)藥、環(huán)境分析、疾病和有效治療研究、再生醫(yī)療研究、天然提取物、中藥研究等，從基礎(chǔ)研究至關(guān)乎人類健康的前沿的生命科學(xué)研究都有相關(guān)產(chǎn)品。

隨著富士膠片集團(tuán)對生命科學(xué)領(lǐng)域的更大重視和投入，今后富士膠片和光將繼續(xù)為中國客戶提供更多前沿、品質(zhì)可靠的產(chǎn)品。