克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液產(chǎn)品及特點(diǎn)
克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液是天恩澤推出的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的革命性產(chǎn)品，它能
使各種常態(tài)的 E.coli 細(xì)胞直接用于快速轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，使廣大用戶不再因?yàn)楹?jiǎn)單的轉(zhuǎn)化
實(shí)驗(yàn)而再為感受態(tài)細(xì)胞的制備，保存和運(yùn)輸?shù)确爆嵉氖虑槎傩?，大大地縮短了基
因克隆實(shí)驗(yàn)的時(shí)間，提高使用者的工作效率。
1. 不需專門制備感受態(tài)細(xì)胞，直接使用常態(tài)的細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)化，隨用隨配，十
分方便。常態(tài)細(xì)胞包括新鮮培養(yǎng)的菌液，新鮮的或4℃放置數(shù)月的培養(yǎng)基菌落，
甘油菌種保存液等。
2. 適用菌種和質(zhì)粒廣泛，用過(guò)的 E.coli 菌種包括K12系的DH5a和Tg1，B系的
BL21（DE3）。用過(guò)的質(zhì)粒有pGEM，pET和克必隆系列等。
3. 轉(zhuǎn)化效率適中，使用10 ng質(zhì)粒轉(zhuǎn)化一般能得到上萬(wàn)個(gè)轉(zhuǎn)化子）效率在10 5 到
10 6 CFU/ μ g質(zhì)粒之間），使用3-5  μ L連接液轉(zhuǎn)化一般能得幾千個(gè)轉(zhuǎn)化子，足
夠篩選重組子使用（但不適合構(gòu)建文庫(kù)）。
4. 單管快速操作，整個(gè)操作可以在一個(gè)1.5 mL塑料離心管中進(jìn)行，zui短可以在
三十分鐘內(nèi)完成，不需要過(guò)夜細(xì)菌培養(yǎng)，熱休克處理甚至恒溫?fù)u床，極其適用
于自動(dòng)化的大規(guī)?？寺『Y選工作。
5. 穩(wěn)定性好，本可以在-20℃條件下長(zhǎng)期保存而不用擔(dān)心轉(zhuǎn)化效率的降低，而感受
態(tài)細(xì)胞在同樣條件下會(huì)迅速失去活性。
使用及效果
將數(shù)個(gè) E.coli 菌落（或50 μ L甘油菌種液，100 μ L新鮮培養(yǎng)液）轉(zhuǎn)入裝有1 mL
液體培養(yǎng)基的1.5 mL塑料離心管中，37℃水浴1小時(shí)，室溫10000 g離心1分鐘后
去盡上清，加入轉(zhuǎn)化液和1-10 μ L連接反應(yīng)液，輕柔混勻，-20℃放置致凝，冰浴5
分鐘，加入1 mL 液體培養(yǎng)基，37℃水浴1小時(shí)，取0.1-0.3 mL涂于含相關(guān)抗菌素
的固體培養(yǎng)基上，37℃過(guò)夜培養(yǎng)后即得轉(zhuǎn)化菌落。120506-200    T4 聚核苷酸激酶    200U    197    10-48
120507-25    Xa 因子蛋白酶    25μg    490    10-100
120507-50    Xa 因子蛋白酶    50μg    890    10-100
120508-0.032    腸激酶 ( 輕鏈 )    0.032μg    790    10-100
120508-0.063    腸激酶 ( 輕鏈 )    0.063μg    1490    10-100
120509-20    Poly(A) 聚合酶    20U    690    10-30
120510-200    ATP 依賴的 DNase    200U    590    10-68
120511-100    CpG 甲基轉(zhuǎn)移酶 (M.SssI)    100U    860    10-46
120512-20    即用型藍(lán)白 T 載體 B 型 (T7-T3, 有 MCS)    20 次    290    6-10
120513-20    即用型藍(lán)白 T 載體 C 型 (T7-T3，無(wú) MCS)    20 次    290    6-11
120514-20    即用型藍(lán)白 T 載體 D 型 ( 無(wú)啟動(dòng)子，有 MCS)    20 次    290    6-12
120515-20    即用型藍(lán)白 T 載體 E 型 ( 無(wú)啟動(dòng)子，無(wú) MCS)    20 次    290    6-13
120516-200    自誘導(dǎo)液體培養(yǎng)基 (arab 啟動(dòng)子 )    200mL    390    6-42
120517-100    大腸桿菌零誘導(dǎo)培養(yǎng)基    100mL    390    6-45
120520-10    OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞    10×100μL    397    6-28c