小鼠肺栓塞模型

肺血栓栓塞癥(PTE)是內(nèi)源性或外源性血栓栓子堵塞肺動(dòng)脈所引起肺循環(huán)障礙的臨床和病理生理綜合征，是一種相對(duì)常見(jiàn)的心血管急重癥，其因栓子堵塞肺動(dòng)脈血管床從而引起危及生命的右心衰竭。其發(fā)病率在心血管疾病中僅次于冠心病和高血壓，未經(jīng)及時(shí)治療的肺栓塞死亡率高達(dá)20%~30%，由于對(duì)該病的認(rèn)識(shí)不足，加上其臨床表現(xiàn)缺乏特異性，誤漏診率高達(dá)70%~90。該病發(fā)病率高，預(yù)后嚴(yán)重，是肺部疾患中zui常見(jiàn)的死亡原因.

    1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    SPF級(jí)Balb/C小鼠，雄性，周齡為4w~6w，體重為22g~26g。

2.實(shí)驗(yàn)分組：

實(shí)驗(yàn)分組：正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組、受試藥組，每組15只。

3.主要試劑

凝血酶

    4.建模方法

4.1選取體重22g-26g的小鼠，以3%戊巴比妥鈉，以80mg/kg劑量腹腔麻醉小鼠，小鼠取仰臥位，將四肢和頭部用膠布固定在解剖板上，用8%硫化鈉對(duì)頸部脫毛，活力碘消毒后準(zhǔn)備手術(shù)。

4.2頸部正中切口，逐步分離軟組織和肌肉，暴露左側(cè)頸靜脈，向頸內(nèi)靜脈注射

凝血酶溶液（溶于0.9%生理鹽水，劑量20U/kg）。

4.3清理術(shù)野，縫合頸部切口，待小鼠清醒后，將其放回潔凈籠具后放回飼養(yǎng)室飼養(yǎng)，定期觀察小鼠狀態(tài)及死亡情況并做好記錄。

4.4假手術(shù)除僅向頸靜脈注射生理鹽水以外，其他操作均相同。

4.5 在模型建立后24h，分別處死小鼠，取左側(cè)部分肺組織于4%多聚甲醛溶液固定，石蠟包埋；其余肺組織-80度保存。

5.模型的評(píng)價(jià)

5.1外周血血小板計(jì)數(shù)

取小鼠外周血20μl,置于盛有380μl (10g/L)草酸氨稀釋液的無(wú)菌EP管中,混勻后用血球記數(shù)板行血小板計(jì)數(shù)。

5.2組織病理評(píng)價(jià)

取左肺4%多聚甲醛固定，然后將肺組織常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片（厚度為5μm），HE染色。術(shù)后幾小時(shí)即可見(jiàn)肺泡里大量滲出并有出血，肺泡間隔增厚，其內(nèi)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，可見(jiàn)較大的動(dòng)脈栓塞，血小板和紅細(xì)胞聚集粘附在栓子周圍。

5.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（`x ±ｓ）表示，采用ｔ檢驗(yàn)，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05表示有顯著性差異，P<0.01表示有極顯著性差異。