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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·12年
20131ES06植物蛋白提取試劑盒
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 20131ES06 產(chǎn)品型號(hào)
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- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：461更新時(shí)間：2024-07-23 14:09:20
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | 20131ES06 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
植物蛋白提取試劑盒
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
植物蛋白提取試劑盒 | 20131ES06 | 100 T | 785 |
植物蛋白提取試劑盒 | 20131ES10 | 200 T | 1455 |
產(chǎn)品描述
本試劑盒在利用液氮充分磨碎植物組織的同時(shí)，采用在變性條件下的利用特殊的試劑對(duì)植物細(xì)胞釋放出來(lái)的蛋白進(jìn)行提取，試劑A中含有sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多種抑制劑，有效抑制蛋白酶活性，///大程度地保持所抽提蛋白質(zhì)的完整性；而且可以實(shí)現(xiàn)植物細(xì)胞、組織或原生質(zhì)體樣品總蛋白的提取。
Yeasen開(kāi)發(fā)的本產(chǎn)品，每次可以根據(jù)樣本與裂解液的推薦體積，實(shí)現(xiàn)包括膜蛋白、核蛋白、胞質(zhì)蛋白以及在植物組織中含有的稀有蛋白在內(nèi)的全蛋白。分離得到的蛋白組份可應(yīng)用于SDS-PAGE、Western Blot、免疫沉淀等。試劑盒的使用次數(shù)按照植物組織樣本提取的量來(lái)確定。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |
20131ES06（100T） | 20131ES10（200T） | |
試劑A | 50 mL | 100 mL |
試劑B | 0.5 mL | 1 mL |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋下運(yùn)輸，建議A組分產(chǎn)品分裝保存在-20℃；B組分保存于-20℃，有效期1年。
操作說(shuō)明
由于A組分溶解較慢，所以實(shí)驗(yàn)前需要提前從冰箱中取出溶解待使用！取適量的A組分，按照B組分與A組分1：100的比例進(jìn)行配置好裂解緩沖液。
1.植物細(xì)胞樣品蛋白提取
1）離心收集植物細(xì)胞，按照每5~10×105細(xì)胞加入100-200μL的裂解緩沖液的比例。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸，在冰上裂解5-10 min。
2）充分裂解后，10000-14000 g離心5 min，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2.對(duì)于植物原生質(zhì)體樣品
1）把組織/剪切成細(xì)小的碎片，制備原生質(zhì)體。(可選)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化原生質(zhì)體，繼續(xù)培養(yǎng)16-48 h，并可以根據(jù)需要給予適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)條件處理。
2）100-500g低速離心收集原生質(zhì)體。
3）按照每5~10×105原生質(zhì)體加入100-200μL的裂解緩沖液。輕彈管底以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的原生質(zhì)體沉淀。如果原生質(zhì)體量較多，必需分裝成5~10×105原生質(zhì)體/管，然后再裂解。
3.對(duì)于植物組織樣品
1）取出-80℃低溫保存或者冷凍處理的新鮮植物組織/剪切成細(xì)小的碎片（新鮮組織可用液氮處理后再進(jìn)行剪切）。
2）將植物碎片放入預(yù)冷消毒的研缽中，往研缽中小心加入液氮，然后利用研磨杵充分研磨植物碎片至粉末。
3）轉(zhuǎn)移粉末至干凈的離心管中，按照每100 mg植物組織加入500-1000μL的裂解緩沖液 (如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)，加入裂解液后強(qiáng)烈vortex充分混勻，使其充分裂解；
4）裂解后，10000-14000g離心3-5min，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事項(xiàng)
1. 使用液氮時(shí)，請(qǐng)注意戴上防凍手套，避免液氮凍傷。若研磨的組織量較多，可多次加入液氮，保持植物組織處于充分冷凍狀態(tài)時(shí)研磨。
2. 植物細(xì)胞壁的破碎程度會(huì)影響蛋白的抽提效果。盡量將植物組織充分研磨粉碎，以破碎細(xì)胞壁。促進(jìn)細(xì)胞蛋白的釋放，同時(shí)盡量不要取植物的維管組織。
3．植物在裂解后，產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物，屬正?，F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過(guò)超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見(jiàn)的轉(zhuǎn)錄因子，通常不必進(jìn)行超聲處理，就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。
4. 可以采用我公司生產(chǎn)的蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒（20201ES）對(duì)提取樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行定量。
5. 對(duì)于SDS-PAGE 電泳，可以采用我公司生產(chǎn)的8分鐘快速考馬斯藍(lán)染色液（20309ES） 對(duì)膠進(jìn)行染色。
6 本試劑盒只能夠用于體外實(shí)驗(yàn)，不能夠用于臨床、治療和動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)等。
HB200907
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