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36312ES64Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody
參考價(jià): 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 36312ES64 產(chǎn)品型號(hào)
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 查看pdf文檔 產(chǎn)品資料
  • 上海市 所在地

訪問(wèn)次數(shù):734更新時(shí)間:2021-07-08 15:50:03

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100t
貨號(hào) 36312ES50 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
翊圣IHC Kit for Rabbit Primary Antibody可用于檢測(cè)以兔單克隆或多克隆抗體為一抗的免疫組化實(shí)驗(yàn),檢測(cè)原理基于高特異性高親和力的鏈霉親和素-生物素結(jié)合:已固定或培養(yǎng)細(xì)胞的抗原與一抗形成抗原抗體復(fù)合物,生物素化二抗特異性結(jié)合上述復(fù)合物,經(jīng)辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素特異性識(shí)別生物素(即抗原所在位置),后經(jīng)辣根過(guò)氧化物酶底物顯色即可檢測(cè)相應(yīng)抗原。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格

Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody

兔免疫組化(IHC)檢測(cè)試劑盒

36312ES50

100 T

1186

 

產(chǎn)品描述

 

YEASEN IHC Kit for Rabbit Primary Antibody可用于檢測(cè)以單克隆或多克隆抗體為一抗的免疫組化實(shí)驗(yàn),檢測(cè)原理基于高特異性高親和力的鏈霉親和素-生物素結(jié)合:已固定或培養(yǎng)細(xì)胞的抗原與一抗形成抗原抗體復(fù)合物,生物素化二抗特異性結(jié)合上述復(fù)合物,經(jīng)辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素特異性識(shí)別生物素(即抗原所在位置),最后經(jīng)辣根過(guò)氧化物酶底物顯色即可檢測(cè)相應(yīng)抗原

本品可適用于多種類型樣本,如石蠟包埋切片、冰凍切片、培養(yǎng)細(xì)胞涂片及血液標(biāo)本等。

 

產(chǎn)品組分

 

組分

組分編號(hào)

組分名稱

產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格

儲(chǔ)存條件

Part Ⅰ

36312-A

1×PBS緩沖液(干粉,4L)

1L×4袋

室溫

36312-B

100×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液

32 mL

2-8℃

36312-C

內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑(即用型)

5 mL

2-8℃

36312-D

抗體稀釋液(即用型)

5 mL

2-8℃

36312-E

封閉用正常山羊血清工作液(即用型)

5 mL

2-8℃

36312-F

生物素標(biāo)記羊抗兔IgG(即用型)

5 mL

2-8℃

36312-G

辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液(即用型)

5 mL

2-8℃

36312-J

蘇木素染液(即用型)

6 mL

室溫

Part Ⅱ

36312-H

DAB kit (20×)顯色液

0.5 mL

-20℃

36312-I

DAB kit (20×)稀釋液

0.5 mL

-20℃

 

運(yùn)輸和保存方法

 

冰袋運(yùn)輸。Part Ⅱ,H,I組分-20保存,其他組分4保存,有效期1年。勿冰凍!

 

注意事項(xiàng)

 

1)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2)DAB是一潛在致癌物,使用時(shí)請(qǐng)注意自我防護(hù)。

3)檢測(cè)樣本時(shí)需同時(shí)做陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照。

4)本產(chǎn)品僅作科研用途!

 

準(zhǔn)備試劑

 

二甲苯、乙醇、甲醇、去離子水、封片劑(Cat#36313

 

使用方法

 

1.脫蠟水化。將石蠟切片置于新鮮二甲苯脫中浸泡15 min,重復(fù)三次。去除多余的液體后,依次置于無(wú)水乙醇、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇、70%乙醇,各浸泡5 min,蒸餾水(或自來(lái)水)沖洗5 min。用PBS緩沖液(試劑A,將干粉溶解于2 L去離子水中)沖洗切片5 min,重復(fù)三次。

2.抗原修復(fù)。將脫蠟水化后的組織切片置于燒杯(或修復(fù)盒)中的耐高溫塑料切片架上,加適量修復(fù)液1×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(試劑B,將100×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液加去離子水稀釋成1×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液),液面要浸過(guò)切片組織一定高度,將修復(fù)盒置于沸水中煮沸修復(fù)15 min后取出玻片,自然涼至室溫。用PBS緩沖液沖洗切片5 min,重復(fù)三次。注意:抗原修復(fù)時(shí),修復(fù)液務(wù)必保證切片始終浸泡在液體內(nèi),一般情況:修復(fù)液的量約為800 mL/1架。

3.阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。用吸水紙擦干玻片,免疫組化筆在組織周圍畫(huà)圈,滴加50 μL內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑(試劑C)到切片組織上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育30 min,用PBS緩沖液沖洗切片5 min,重復(fù)三次。

4.血清封閉。用吸水紙擦干玻片,滴加50 μL正常山羊血清工作液(試劑E),37℃封閉20 min,以減少非特異性染色。

5.一抗孵育。用抗體稀釋液(試劑D)將一抗原液稀釋成工作液,用吸水紙擦干玻片組織周圍的液體,滴加適量抗體工作液,置于孵育4℃孵育過(guò)夜或37℃孵育1h-2h。

6.復(fù)溫。4℃過(guò)夜后從冰箱拿出樣本,在室溫下孵育15 min 復(fù)溫(抗體孵育為4℃過(guò)夜選用此步驟,如室溫孵育直接進(jìn)入下一步清洗)。用PBS緩沖液沖洗切片5 min,重復(fù)三次。

7.二抗孵育。吸水紙擦干切片后滴加50 μL生物素標(biāo)記的羊抗兔IgG(試劑G),37℃孵育20 min,用PBS緩沖液沖洗切片5 min,重復(fù)三次。

8.三抗孵育。吸水紙擦干切片后滴加50 μL辣根酶標(biāo)記的鏈酶卵白素孵育(試劑H),37℃孵育20 min,用PBS緩沖液沖洗切片5 min,重復(fù)三次。

9.顯色。甩去PBS緩沖液,吸水紙擦干切片;每張切片滴加新鮮配制的DAB工作液50 μL(試劑H:試劑I:試劑A=1:1:18 比例配置),孵育3-5 min,光學(xué)顯微鏡下觀察染色結(jié)果,切勿顯色過(guò)深;顯色后用自來(lái)水沖洗切片終止顯色。

【注】 DAB顯色液需現(xiàn)配現(xiàn)用,避光放置,且在30 min內(nèi)使用。

 可根據(jù)需要一次染多張切片,各種試劑量按照上述比例放大即可。

10.復(fù)染。滴加適量蘇木素染液(試劑J)復(fù)染,孵育1-5 min,自來(lái)水沖洗min,滴加鹽酸酒精分化液分化30 s,自來(lái)水沖洗。

11.脫水封片。將玻片依次置于70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、無(wú)水乙醇,各浸泡5 min,再將玻片放入二甲苯中浸泡15 min,重復(fù)三次。玻片取出來(lái)稍晾干,用中性樹(shù)膠封片。

12.結(jié)果判定

在光學(xué)顯微鏡下對(duì)染色的切片觀察并判斷。蘇木素染細(xì)胞核為藍(lán)色,DAB顯色的陽(yáng)性表達(dá)為棕黃色。



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