Oxoid山li醇麥康凱瓊脂CM0813B,CM0981B,改良TSB CM0989B,EC肉湯CM0853B等

英國Oxoid產(chǎn)品范圍闊及與疾病、微生物診斷相關(guān)的臨床檢驗(yàn)科學(xué)、基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究與工業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域。

Oxoid山li醇麥康凱瓊脂CM0813B,CM0981B,改良TSB CM0989B,EC肉湯CM0853B等，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：Oxoid

產(chǎn)品名稱：山li醇麥康凱瓊脂CM0813B,CM0981B,改良TSB CM0989B,EC肉湯CM0853B等

產(chǎn)品貨號(hào)：CM0813B/CM0981B/CM0989B/CM0853B

產(chǎn)品規(guī)格：500g

Oxoid山li醇麥康凱瓊脂，改良TSB,EC肉湯等

產(chǎn)品說明：
大腸桿菌O157的培養(yǎng)基：

山li醇麥康凱瓊脂  CM0813B

山li醇麥康凱瓊脂(含BCIG)  CM0981B

EC肉湯(減少膽鹽) CM0990B

改良胰蛋白胨大豆肉湯  CM0989B

頭bao克肟鼠李糖山li醇麥康凱瓊脂  CM1005B

EC肉湯 CM0853B

EC肉湯（含MUG）  CM0979B

干粉培養(yǎng)基10-30℃保存

山li醇麥康凱瓊脂 (Sorbitol MacConkey Agar)

培養(yǎng)大腸桿菌O157的選擇性培養(yǎng)基

山li醇麥康凱瓊脂 CM0813

配方表：

*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方

C-T添加劑 SR0172E

制備方法：

取51.5g培養(yǎng)基至1L蒸餾水中，煮沸至wan全溶解，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至50℃，混勻倒入無菌培養(yǎng)皿。

如果需要的話，根據(jù)SR0172的產(chǎn)品說明進(jìn)行溶解，每500ml培養(yǎng)基加入1瓶SR0172E，加入冷卻后的培養(yǎng)基中，混勻后再倒平板。

產(chǎn)品描述：

大腸桿菌O157被認(rèn)為是出血性結(jié)腸炎的一個(gè)病因，是出血性腹瀉、嚴(yán)重的腹部疼痛、溶血性尿毒癥的病理特征菌。因此，它是一個(gè)特別重要的人病原體。

山li醇麥康凱瓊脂可以用來提取病理大腸桿菌O157.它的配方是由Rappaport and Henig的描述基礎(chǔ)上而來，是根據(jù)3號(hào)麥康凱瓊脂改變的，將其中的乳糖變?yōu)榱松絣i醇。大腸桿菌O157不發(fā)酵山li醇，因此產(chǎn)生無色菌落。相比之下，大部分的大腸桿菌發(fā)酵山li醇，形成粉色菌落。山li醇麥康凱瓊脂的有效性被March and Ratnam做過確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，他們的文章得出99.99%的靈敏度和85%的特異性，所以認(rèn)為這款培養(yǎng)基是一款簡(jiǎn)單地，不昂貴的，快速的，可信的大腸桿菌O157的篩選培養(yǎng)基。

Chapman等人在山li醇麥康凱瓊脂中添加頭bao克肟和亞碲酸鉀，以增加培養(yǎng)基的選擇性。這種濃度的亞碲酸鉀將O157血清型與其他血清型區(qū)分出來，并抑制普羅威登斯菌和嗜水氣單胞菌，頭bao克肟抑制變形桿菌屬。

在山li醇麥康凱瓊脂中添加頭bao克肟和亞銻酸鉀的方法再FDA 細(xì)菌學(xué)分析手冊(cè)中有描述。

培養(yǎng)基35℃培養(yǎng)24小時(shí)，避免過長(zhǎng)時(shí)間的培養(yǎng)。

可使用大腸桿菌O157乳膠凝集試劑盒DR0620，來快速鑒定可疑的O157菌落。

保存：

干粉培養(yǎng)基10-30℃保存，SR0172在0℃以下保存，效期之前使用。制成培養(yǎng)基在2-8℃保存，避免光的照射，最多保存2周。

山li醇麥康凱瓊脂(含BCIG) CM0981

含有5-*-4-*-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷酸(BCIG)

配方表：

*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方

制備方法：

取51.6g培養(yǎng)基至1L蒸餾水中，混勻，121℃高壓滅菌15分鐘，混勻倒入無菌培養(yǎng)皿。

產(chǎn)品描述：

含有BCIG的山li醇麥康凱瓊脂（SMAC）含有兩種大腸桿菌O157的選擇性因子：對(duì)山li醇的不發(fā)酵，β-葡萄糖苷酶的活性的出現(xiàn)。在一次對(duì)人工污染的肉類樣品的測(cè)試中，含有BCIG的SMAC將大腸桿菌O157的失敗檢出的概率下降了36%。

這款培養(yǎng)基中的5-*-4-*-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷酸(BCIG)是β-葡萄糖苷酶的底物，這種酶并不在O157大腸桿菌中常見。非發(fā)酵山li醇，以及β-葡萄糖苷酶陰性的大腸桿菌O157生成麥色菌落。具有β-葡萄糖苷酶的微生物將分解BCIG底物，形成吲哚酚（或鹵代酚），迅速形成不溶性染料或其類似物，導(dǎo)致明顯的藍(lán)綠色菌落。

在35-37℃培養(yǎng)24小時(shí)，查看麥色菌落，可以使用大腸桿菌O157乳膠凝集試劑盒DR0620或DR0102對(duì)可疑菌落進(jìn)行確認(rèn)。

大腸桿菌O157一般不發(fā)酵山li醇，并且是β-葡萄糖苷酶陰性，因此形成無色菌落。大部分大腸桿菌其他血清型是β-葡萄糖苷酶陽性，可以發(fā)酵山li醇，因此出現(xiàn)藍(lán)色至紫色菌落。

如果高含量的革蘭氏陰性菌需要被抑制，可以加入Cefixime-Tellurite (CT) Selective Supplement SR0172增加選擇性。

SMAC with BCIG是一種 USDA/FSIS 認(rèn)可的培養(yǎng)基，用來預(yù)鑒定Escherichia coli O157:H7/NM

質(zhì)控菌株：

Escherichia coli O157:H7 (glucuronidase-negative) NCTC12900生長(zhǎng)良好，無色菌落

Escherichia coli (glucuronidase-positive) ATCC® 25922生長(zhǎng)良好，藍(lán)色/紫色菌落

Enterococcus faecalis ATCC® 19433 被抑制

頭bao克肟鼠李糖山li醇麥康凱瓊脂基礎(chǔ) CM1005

CR-SAMC Agar Base，與SR0191E配成CR-SAMC Agar

配方表：

*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方

SR0191E：每小瓶含0.025mg頭bao克肟，在每升培養(yǎng)基中加入0.05mg頭bao克肟。

制備方法：

取28.25g培養(yǎng)基至500ml蒸餾水中，混勻后121℃高壓滅菌15分鐘。冷卻到50℃，加入已經(jīng)按照說明書溶解的1瓶SR0191E（每小瓶加入2ml無菌水），混勻后倒平板。

產(chǎn)品描述：

在山li醇麥康凱瓊脂SMAC中加入鼠李糖，增加了大腸桿菌O157在背景菌種的區(qū)分度。大約60%的不發(fā)酵山li醇的大腸桿菌血清型（O157血清型除外）會(huì)發(fā)酵鼠李糖。頭bao克肟的存在降低了競(jìng)爭(zhēng)菌的數(shù)量，特別是變形桿菌屬，它在非山li醇發(fā)酵菌中經(jīng)常占了很大的比重。

大腸桿菌O157一般不發(fā)酵山li醇和鼠李糖，所以產(chǎn)生麥色菌落。但是，大部分不發(fā)酵山li醇的其他血清型大腸桿菌發(fā)酵鼠李糖，這些菌落為紅色或粉色。

CR-SCAM與選擇性更強(qiáng)的CT-SACM聯(lián)用，可以使增菌肉湯中的大腸桿菌O157的恢復(fù)率更高。

培養(yǎng)基在35-37℃培養(yǎng)24小時(shí)

改良胰蛋白胨大豆肉湯 (Tryptone Soya Broth Modified, mTS)

用于培養(yǎng)大腸桿菌O157的選擇性增菌肉湯，可以添加合適的添加劑增加選擇性

改良胰蛋白胨大豆肉湯基礎(chǔ) CM0989

配方表：

*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方

SR0190A VCC選擇性添加劑：

SR0181E：每小瓶10mg萬古mei素，每小瓶配500ml培養(yǎng)基。

制備方法：

取33g改良TSB至1L蒸餾水中，混勻，分裝支最終容器中，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至50℃后添加所需的添加劑。

產(chǎn)品描述：

mTSB是一種營養(yǎng)豐富的選擇性肉湯基礎(chǔ)，可以37℃震蕩培養(yǎng)24小時(shí)，也有人43℃攪拌培養(yǎng)，使食品樣品中的恢復(fù)率更佳。

緩沖蛋白胨水CM0509，添加SR0190，用來從牛肉的尸體，牛的糞便和牛奶和碎牛肉中提取大腸桿菌O157；

由SR0190E添加到CM0989中，組成EHEC enrichment broth (EEB)，克服了有些大腸桿菌O157的抗生素抗性。

Both BPW-VCC (CM0509+SR0190) and EEB (CM0989+SR0190) are incubated for 6hr at 37°C

Tryptone Soya Broth (CM0129)可以通過增加一些成分變?yōu)?span>CM0989，添加4g/L的磷酸二氫鉀，以及1.5g/L的膽鹽。膽鹽抑制孢子和腸球菌屬，但能使大腸桿菌O157生長(zhǎng)。VCC選擇性添加劑含有三種抗生素，萬古mei素抑制革蘭氏陽性菌，頭bao克肟抑制變形桿菌，頭孢磺啶抑制假單胞菌。

EC 肉湯 (EC Broth)

EC肉湯 CM0853

配方表：

*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方

制備方法：

取37g培養(yǎng)基至1L蒸餾水中，分裝至最終容器中，121℃高壓滅菌15分鐘。

產(chǎn)品描述：

EC肉湯用于食品和環(huán)境中大腸桿菌的篩選。也適用于牛奶和奶制品中大腸桿菌的計(jì)數(shù)。

大腸桿菌普遍存在于食品和環(huán)境中，為革蘭氏陰性菌。大腸桿菌可用來指示糞便的污染，雖然一定的攝取量無害，然而，某些菌株可導(dǎo)致腹瀉，甚至可引起更嚴(yán)重的疾病。

大腸桿菌的分離鑒定利用大腸桿菌在44-45.5℃的條件下培養(yǎng)24-48小時(shí)乳糖被降解產(chǎn)氣，培養(yǎng)溫度取決于培養(yǎng)方法或者樣本來源：
貝類        44.5℃
牛奶和牛制品44.0℃
水和污水    44.5℃
其他食物    45.5℃

EC 肉湯中含有乳糖緩沖肉湯和膽鹽3 號(hào)。膽鹽的存在能夠抑制孢子和腸球菌的生長(zhǎng)，但是大腸桿菌能夠生長(zhǎng)。

制成培養(yǎng)基最多保存4周。

EC肉湯（含MUG） CM0979

配方表：

*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方

制備方法：

取37g培養(yǎng)基至1L蒸餾水中，分裝至含有杜氏小管的最終容器中，121℃高壓滅菌15分鐘。

產(chǎn)品描述：

β-葡萄糖苷酶是大腸桿菌的高度特異性的酶，研究表明90%的從環(huán)境中分離的大腸桿菌是β-葡萄糖苷酶陽性。這款培養(yǎng)基中添加的高度靈敏的底物4-methylumbelliferyl-?-D-glucuronide (MUG)與β-葡萄糖苷酶反應(yīng)，生成4-methylumbelliferone ，在366nm紫外下顯綠色/藍(lán)色熒光。

含有MUG的EC肉湯是被FDA/BAM認(rèn)可的培養(yǎng)方法，用于從貝類和肉類中確認(rèn)大腸桿菌。

注意事項(xiàng)：

確保使用的玻璃容器不會(huì)產(chǎn)生熒光，正確使用紫外燈以確保安全。

一些病原菌，特別是大腸桿菌O157：H7一般是葡萄糖苷酶陰性，在這種測(cè)試中會(huì)產(chǎn)生不正確的結(jié)果。

其他腸桿菌比如變形桿菌也葡萄糖苷酶陽性。

EC肉湯（減少膽鹽） CM0990

配方表：

*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方

制備方法：

取18.3g培養(yǎng)基至500ml蒸餾水中，121℃高壓滅菌15分鐘。冷卻到50℃添加已經(jīng)按照說明書溶解的1小瓶SR0181E。

產(chǎn)品描述：

新生霉素可以抑制革蘭氏陽性菌，比如金黃色葡萄球jun（包括耐甲yang西林的），以及其他葡萄球菌。有一些革蘭氏陰性菌包括流血嗜血桿菌，奈瑟氏菌，一些變形桿菌也同樣對(duì)新生霉素敏感，但是大部分腸桿菌對(duì)新生霉素耐受。

EC肉湯（減少膽鹽）可以對(duì)食品和環(huán)境樣品中，特別是冰凍樣品中的大腸桿菌O157進(jìn)行增菌培養(yǎng)。添加新生霉素SR0181E可以增加選擇性。培養(yǎng)基中這種濃度的膽鹽可以抑制孢子和腸球菌，但是不影響大腸桿菌O157的生長(zhǎng)，在37℃時(shí)。新生霉素的添加量是20mg/L。

Oxoid山li醇麥康凱瓊脂，改良TSB,EC肉湯等