上海美析儀器有限公司
超氧化物岐化酶(SOD)的應用方案
檢測樣品：酶
檢測項目：活性
方案概述：SOD是含金屬輔基的酶。高等植物含有兩種類型的SOD:Mn-SOD和Cu.Zn-SOD，它們都催化下列反應:由于超氧自由基(02)為不穩(wěn)定自由基，壽命極短，測定SOD活性一般為間接方法。并利用各種呈色反應來測定SOD的活力。核黃素在有氧條件下能產生超氧自由基負離子02-..-，當加入NBT后，在光照條件下，與超氧自由基反應生成單甲躦(黃色)，繼而還原生成二甲躦……
引言：
SOD是含金屬輔基的酶。高等植物含有兩種類型的SOD:Mn-SOD和Cu.Zn-SOD，它們都催化下列反應:由于超氧自由基(02)為不穩(wěn)定自由基，壽命極短，測定SOD活性一般為間接方法。并利用各種呈色反應來測定SOD的活力。核黃素在有氧條件下能產生超氧自由基負離子02-..-，當加入NBT后，在光照條件下，與超氧自由基反應生成單甲躦(黃色)，繼而還原生成二甲躦，它是一種藍色物質，在560nm波長下有最大吸收。當加入SOD時，可以使超氧自由基與H結合生成H2O2和02，從而抑制了NBT光還原的進行，使藍色二甲攢生成速度減慢。通過在反應液中加入不同量的SOD酶液，光照--定時間后測定560nm波長下各液光密度值，抑制NBT光還原相對百分率與酶活性在一定范圍內呈正比。反應液藍色愈深，說明酶活性愈低。
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