RevIT™ AAV Enhancer提高AAV產(chǎn)量的利器
- 公司名稱 北京西美杰科技有限公司
- 品牌 Mirus Bio/美國
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2023/8/25 17:23:19
- 訪問次數(shù) 549
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
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腺相關(guān)病毒 (AAV) 是基因治療中使用廣泛的傳遞機制。近年來,基于AAV病毒開發(fā)的基因療法的研發(fā)及臨床試驗注冊項目數(shù)量呈指數(shù)級增長,截至目前,美國FDA已批準五項AAV療法,同時,用于基因治療的AAV也是全球市場上最為昂貴的藥物之一,其中售價最高的Hemgenix®,每劑價格約為350萬美元。由于該療法每劑量可能需要1011-1016載量的AAV病毒,如何實現(xiàn)高效的AAV生產(chǎn),已成為工藝流程優(yōu)化中的重要一環(huán)。
西美杰代理的Mirus成立于1996年,在核酸遞送領(lǐng)域深耕多年,TransIT-VirusGEN® GMP 轉(zhuǎn)染試劑支持AAV及慢病毒(LV)從科研到GMP商業(yè)級別生產(chǎn)。不同于傳統(tǒng)基于單組分的轉(zhuǎn)染試劑(如陽離子聚合物聚乙烯亞胺,PEI),Mirus將多聚物及脂質(zhì)技術(shù)進行多重組合,針對不同細胞類型,不同應(yīng)用場景,有著不同轉(zhuǎn)染方案。
Mirus遞轉(zhuǎn)平臺Polymers + Lipids的多重、多功能組合
RevIT™ AAV Enhancer提高AAV產(chǎn)量的利器
在病毒生產(chǎn)工藝方面,除了需要克服細胞遞轉(zhuǎn)過程中的多重阻礙,以實現(xiàn)更高效轉(zhuǎn)染和更低細胞毒性;增強子的加入,還可大幅度提升多種血清型AAV病毒生產(chǎn)載量。但Mirus并沒有止步于此,為了進一步提高下游生產(chǎn)中的AAV產(chǎn)量, 今年七月底西美杰代理的Mirus發(fā)布用于AAV生產(chǎn)的RevIT™ AAV Enhancer,可搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 轉(zhuǎn)染試劑或其他品牌轉(zhuǎn)染試劑 (如PEI等)?;贖EK293懸浮細胞數(shù)據(jù),相對于老版本AAV增強子,RevIT™ AAV Enhancer可將AAV基因組滴度提高1.2-4.9倍,并且使用更便捷,非常容易整合入現(xiàn)有的AAV生產(chǎn)工藝流程中。Mirus RevIT™ AAV Enhancer的推出,使得AAV上游生產(chǎn)成本進一步降低成為可能,進而降低基因治療藥物單劑量成本。
RevIT™ AAV Enhancer
RevIT™ AAV Enhancer:可以將AAV基因組滴度提升1.2-4.9倍
實驗結(jié)果顯示,平行對比Mirus TransIT-VirusGEN®搭配老版本AAV增強子(VirusGen + Enh 1.0)和新版本RevIT™ AAV Enhancer (VirusGen + RevIT),針對AAV2、AAV8、AAV9不同血清型,基因組滴度分別有著1.6、4.9以及1.2倍提升。除此之外,在測試的所有血清型中,使用RevIT™ AAV Enhancer也在不同程度上收獲了更高比例的實心率 (圖1)。該結(jié)果表明,在搭配Mirus TransIT-VirusGEN®轉(zhuǎn)染試劑時,新版本增強劑RevIT™ AAV Enhancer可顯著提高AAV基因組滴度(GC/mL)及實心率(%Full Capsids)。
圖1 . 相比Mirus老版本增強子,加入RevIT™ AAV Enhancer后,可將AAV基因組拷貝數(shù)提升1.2-4.9倍,同時改善AAV病毒實心率。
RevIT™ AAV Enhancer具有廣泛適配性,搭配其他品牌轉(zhuǎn)染試劑(如PEI),AAV病毒基因組滴度有著顯著提升
平行測試兩個品牌轉(zhuǎn)染試劑:Polyplus FectoVIR®轉(zhuǎn)染試劑(“Polymer F”)以及Polyplus PEIpro®轉(zhuǎn)染試劑(“Polymer P”),在加入Mirus RevIT™ AAV Enhancer,針對不同血清型AAV2、AAV8、AAV9,AAV基因組滴度分別有著1.7-2.0x、1.7-2.2x、2.2-2.3x提升(圖2)。實驗結(jié)果表明,在搭配其他品牌病毒轉(zhuǎn)染試劑時,Mirus RevIT™ AAV Enhancer也可顯著提高AAV病毒基因組滴度(GC/mL)。
圖2. “Polymer F”以及“Polymer P”病毒轉(zhuǎn)染試劑搭配Mirus RevIT™ AAV Enhancer,針對不同血清型AAV,其病毒基因組滴度都有著顯著提升。
RevIT™ AAV Enhancer具有廣泛的適配性,可適用于不同培養(yǎng)基體系
Mirus TransIT-VirusGEN®轉(zhuǎn)染試劑搭配RevIT™ AAV Enhancer,在不同品牌的病毒生產(chǎn)培養(yǎng)基中,具有很好的兼容性。測試使用293-VP 2.0細胞,搭配培養(yǎng)基類型包括VPM (Thermo Fisher) 及 BalanCD HEK 293 (Irvine Scientific)。實驗結(jié)果表明,針對不同血清型AAV2、AAV5、AAV8、AAV9,RevIT™ AAV Enhancer在不同培養(yǎng)基實驗條件下,AAV病毒基因組滴度提升方面并無顯著差異(圖3)。
圖3. 更換不同品牌病毒生產(chǎn)培養(yǎng)基,AAV病毒基因組滴度的增加無顯著差異。
RevIT™ AAV Enhancer實驗流程更靈活,在轉(zhuǎn)染的不同時間窗口加入有著近似表現(xiàn)
為了進一步確認加入RevIT™ AAV Enhancer來提高AAV產(chǎn)量是否需要嚴格把控加入時間,平行測試了不同加入的時間點,包括轉(zhuǎn)染前30min或60min、轉(zhuǎn)染時及轉(zhuǎn)染后。實驗結(jié)果顯示,相比于對照組,在不同時間點加入RevIT™ AAV Enhancer, AAV8病毒基因組滴度均有穩(wěn)步的提升(2倍),并且病毒實心率也穩(wěn)定保持在相同水平(圖4)。該實驗結(jié)果表明,RevIT™ AAV Enhancer加入時間點的靈活性,一定程度上簡化了生產(chǎn)工作流。
圖4. RevIT™ AAV Enhancer在轉(zhuǎn)染的不同時間窗口加入有著近似表現(xiàn)
RevIT™ AAV Enhancer提高AAV產(chǎn)量的利器
實驗tips:如何進行病毒轉(zhuǎn)染試劑評估?什么是病毒載量?如何檢測?
更多詳細信息,請查看Technical Resources中Virus Titer Reference Card ,更加詳細地介紹了檢測和計算病毒滴度的詳細方法。
相關(guān)產(chǎn)品信息及鏈接
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 | 鏈接 |
RevIT™ AAV Enhancer | 1.5 ml | MIR 8000 | link |
10 x 1.5 ml | MIR 8006 | ||
VirusGEN® AAV轉(zhuǎn)染試劑及RevIT™ AAV Enhancer | For 1L of Culture | MIR 8007 | |
For 10L of Culture | MIR 8008 | ||
TransIT-VirusGEN®轉(zhuǎn)染試劑 | 0.3 ml | MIR 6703 | link |
0.75 ml | MIR 6704 | ||
1.5 ml | MIR 6700 | ||
5 x 1.5 ml | MIR 6705 | ||
10 x 1.5 ml | MIR 6706 | ||
30 ml | MIR 6720 | ||
TransIT-VirusGEN® GMP級別轉(zhuǎn)染試劑 | 150 ml | MIR 6845-GMP | link |
VirusGEN® AAV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) | 1 kit for 1 L of cell culture | MIR 6750 | link |
VirusGEN® GMP級別AAV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) | 1 Kit - for 50 L of cell culture | MIR 6815-GMP | link |
VirusGEN® LV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) | 1 kit for 1 L of cell culture | MIR 6760 | link |
VirusGEN® GMP級別LV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) | 1 Kit - for 50 L of cell culture | MIR 6825-GMP | link |
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Mirus產(chǎn)品年鑒
西美杰代理的美國Mirus公司成立于1995年,是世界上很早開發(fā)高效、低毒轉(zhuǎn)染試劑的公司,同時也是該類試劑的主要供應(yīng)商之一。其產(chǎn)品線涵蓋化學轉(zhuǎn)染試劑、電轉(zhuǎn)染產(chǎn)品、病毒生產(chǎn)和轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)品,適用于基因功能研究、蛋白生產(chǎn)、病毒載體生產(chǎn)和動物模型構(gòu)建等領(lǐng)域。Mirus許多杰出成果獲得廣大用戶的好評。
北京西美杰科技有限公司是Mirus中國區(qū)代理,始終秉承著專業(yè)、嚴謹?shù)膽B(tài)度為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù),Mirus熱銷轉(zhuǎn)染產(chǎn)品常備現(xiàn)貨。西美杰是Applichem代理,KERRY代理,Pfanstiehl代理,Cygnus代理,c-LEcta DENARASE®代理,SeraCare (KPL)代理,Lifespan(LSBio)代理,Phytotech代理,Agrisera代理,Cali-Bio代理,Jena Bioscience代理,Immundiagnostik代理,Advanced BioMatrix代理,Mirus代理,Alzet代理Genetics代理,Cell Biolabs代理,MYOCEA代理,Gropep代理,MyBioSource代理,Hampton代理,LeeBio代理,Cal Bioreagents代理,Everest Biotech代理,Nordic-Mubio(SCICONS)代理,Exalpha代理,SCIGEN代理,MiTeGen代理,Prospec代理,歡迎大家咨詢訂購。