神經(jīng)元尼氏染色實驗服務

實驗技術(shù)簡介:

Franna Nissl (1860-1919) 1892年創(chuàng)立了Nissl染色法，以發(fā)現(xiàn)Nissl小體和Niss變性而聞名。常用的堿性染料有CresyI violet (焦油紫，甲.酚紫，克紫) ; thionine (硫堇); tolridine blue (甲苯胺藍)等。尼氏體為嗜堿性物質(zhì)，又稱嗜染質(zhì)，光鏡下呈斑塊狀或細粒狀散在均勻分布。在一些大型的運動神經(jīng)元,尼氏體大而多，宛如虎皮花紋，又稱“虎斑"。電鏡下，尼氏體由大量平行排列的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和其間的游離核糖體組成。尼氏體是神經(jīng)元胞體細胞質(zhì)的特征性結(jié)構(gòu)之一，神經(jīng)元胞質(zhì)另外一 特征性結(jié)構(gòu)為神經(jīng)原纖維。

實驗技術(shù)原理:

正常的神經(jīng)細胞都含有一定數(shù)量的尼氏體， 它們主要分布于神經(jīng)細胞的漿中，形狀有大有小，如三角形，有的為橢圓形。這些物質(zhì)能被大部分的藍色染料所染色，這些染料如焦油堅牢紫(Cresyl fast violet)亞甲藍(methylene blue)甲苯胺藍(toluidine blue)硫董(thionin) 等鈄其染為藍色。但是，當神經(jīng)細胞受傷后，胞質(zhì)內(nèi)的尼氏體更可發(fā)生變化，嚴重的可消失。

實驗操作流程:

1、切片脫蠟至水

2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鐘

3、水洗

4、用95%酒精分化

5、*脫水，二甲苯透明，中性樹膠

實驗結(jié)果:

神經(jīng)細胞單位:紫-藍色細胞核:紫藍色尼氏體:紫深藍色

實驗操作流程:

1、切片脫蠟至水

2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鐘

3、水洗

4、用95%酒精分化

5、*脫水，二甲苯透明，中性樹膠

實驗注意事項:

客戶提供:

1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或-80度保存,組織不少于100mg;

2、培養(yǎng)細胞:通過細胞計數(shù)取不少于2x106個細胞于EP管，加入0 .5ml生理鹽水或蛋白保護劑，混溝后保存于冰箱(-80°C, 避免反復凍融) ;

3、血液細胞標本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5m生理鹽水或蛋白保護劑,保存(-80°C可長期保存,避免反復凍融) ;

4、血清或細胞培養(yǎng)液標本:離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管，保存(49C可保存15-20天，-80°C可長期保存，避免反復凍融) ;

5、石蠟切片，冰凍切片以及細胞爬片，涂片等。

6、樣本運輸:可選擇以下任何-種方式寄送標本

組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后，加冰袋寄送;

細胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出) ;

血清或上清液直接加冰袋寄送(送視路程遠近2 -3天可到達)。

交付標準:

1、圖片;

2、完整項目報告(材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實驗結(jié)果)。

其他:

1、應用酒精分化切片，要迅速，防止過度分化，將切片上的顏色全部脫掉。