家貓肺細(xì)胞；FCA-L2價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱  家貓肺細(xì)胞；FCA-L2價(jià)格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性家貓的肺組織。2000年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。

培養(yǎng)條件 M-199：

with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS  

傳代方法 1：

2傳代；3-4天一次  

傳代情況 P4

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 熒光法（-）

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-DCIR/CLEC4A/FITC 熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-MAdCAM-1/FITC 熒光素標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CAMK1D 鈣調(diào)蛋白激酶CaMK1D抗體 規(guī)格 0.2ml

Cyclin B1 周期素B1抗原 0.5mg

H3N7 hemagglutinin 英文名稱： 流感病毒H3N7血凝素抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh SET translocation SET易位蛋白抗體(髓系白血病相關(guān)蛋白) 規(guī)格 0.2ml

Anti-MAdCAM-1/FITC 熒光素標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
L-HDC (L-Histidine decarboxylase) L-組氨酸脫羧酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Angiotensin II type 1A receptor 血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CaMK2 alpha (Thr305) 磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體 規(guī)格 0.1ml

過(guò)氧化物酶阻斷劑B 10ml 推薦用于石蠟切片,孵育10分鐘.

VHLH 英文名稱： 腦視網(wǎng)膜血管瘤G7蛋白抗體(逢希伯-林道氏病) 0.2ml

Dbx2 英文名稱： 大腦發(fā)育同源蛋白2抗體 0.2ml

Anti-Angiotensin II type 1A receptor 血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit anti-mouse IgG-Fc fragment whole serum 兔抗小鼠IgG-Fc段抗血清 1ml

Factor I light chain 英文名稱： 補(bǔ)體因子I輕鏈抗體 0.2ml

白細(xì)胞介素-16抗體 anti-IL-16/LCF 0.2ml

Anti-ProADM (Adrenomedullin)-N20 peptide /FITC 熒光素標(biāo)記腎上腺髓質(zhì)素前提N端20肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PTPN6(Ser591) 磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-human IgA Whole serum 兔抗人IgA抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
Anti-phospho-STAT5a(pThr694)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG 小鼠抗兔IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體 Anti-GCS 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml

FKBP10 英文名稱： 肽基脯酰順反異構(gòu)酶FKBP10抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Smad3(Ser213) 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgG 小鼠抗兔IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg