細(xì)胞名稱  豹貓肺成纖維樣細(xì)胞；LCL1培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性豹貓的肺組織。1985年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%NBS  

傳代方法 1：

2傳代；3-4天一次  

傳代情況 P3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 熒光法（-）

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 B類
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞；LCL1培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-E.coli O157/FITC 熒光素標(biāo)記抗大腸埃希氏菌O157抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-MrpL28 /FITC 熒光素標(biāo)記線粒體核糖體蛋白L28抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C1orf83 1號染色體開放閱讀框83抗體 規(guī)格 0.2ml

rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag) 重組人白介素-1受體拮抗劑 100ug

H3N2 hemagglutinin 英文名稱： 流感病毒H3N2血凝素抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh RUNX1T1/ETO 周期素D相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-MrpL28 /FITC 熒光素標(biāo)記線粒體核糖體蛋白L28抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LHRH(Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 人黃體生成素釋放激素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-LH 促黃體生成素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh KLK5 激肽釋放酶5抗體 規(guī)格 0.1ml

ADRA1A(Human adrenergic alpha-1A receptor) ELISA Kit 人能a1A受體 96T

PYK2 英文名稱： 富含脯酸的酪酸激酶2抗體 0.1ml

Calsequestrin 英文名稱： 肌鈣集蛋白/收鈣素抗體 0.2ml

Anti-LH 促黃體生成素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml

GNPTG 英文名稱： 溶酶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh AMN1 細(xì)胞核重定位及紡錘體檢查點(diǎn)蛋白AMN1抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-phospho-JAK2(Tyr221) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-SHP-1/FITC 熒光素標(biāo)記造血細(xì)胞磷酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-COX10/FITC 熒光素標(biāo)記COX10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-PKB/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ASAP3 GTP酶激活蛋白ASAP3抗體 規(guī)格 0.2ml

Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml

GJA3 英文名稱： 間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格 0.5ml

Anti-PKB/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。