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深圳瑞清生物信息科技有限公司
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ELISA測定主要計(jì)算方法2023/05/29
1.陽性判定值用此法判斷結(jié)果要求實(shí)驗(yàn)條件十分恒定，試劑的制備必須標(biāo)準(zhǔn)化，陽性和陰性的對照品應(yīng)符合一定的規(guī)格，須配用精密的儀器，并嚴(yán)格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢測而得到的?，F(xiàn)舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿，陽性對照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后，先計(jì)算陰性對照A值的平均數(shù)（NCX）和陽性對照A值的平均數(shù)（PCX），兩個平均數(shù)的差（P-N
如何選擇ELISA試劑盒2023/05/23
如何選擇ELISA試劑盒1.特異性：ELISA試劑盒的特異性于試劑盒的關(guān)鍵組分，抗體對有關(guān)，若抗體對中之一為多抗，另一個必須為單抗，建議使用雙單抗，2、靈敏度：靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒，如果待檢指標(biāo)量很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可選擇高敏的ELISA試劑盒。3、重復(fù)性：科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性，一般ELISA試劑盒，期板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。4、簡便性：試劑盒在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下，實(shí)驗(yàn)時間越短，操作越便
ELISA試劑盒的試驗(yàn)詳細(xì)實(shí)踐2023/05/22
我司供應(yīng)的ELISA試劑盒具體檢測內(nèi)容今起發(fā)布于網(wǎng)上，為大家提供平時在實(shí)驗(yàn)室外看不到的試劑檢測內(nèi)容。方便老師們做個參考。如需了解更多相關(guān)文章/新聞，均可登錄我司查詢，或致電業(yè)務(wù)部為您解答。1.建立標(biāo)準(zhǔn)曲線：設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔8孔，每孔中各加入樣品稀釋液100ul，*孔加標(biāo)準(zhǔn)品100ul，混勻后用加樣器吸出100ul，移至第二孔。如此反復(fù)作對倍稀釋至第六孔，zui后，從第六孔中吸出100ul棄去。第七孔為空白對照，第八孔為零孔。2.加樣：待測品孔每孔各加入待測樣品100ul混勻。3.將反應(yīng)板充分混勻后粘上封
ELISA試劑盒檢測血清的詳細(xì)留意事項(xiàng)2023/05/19
ELISA試劑盒檢測血清的詳細(xì)留意事項(xiàng)ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。在檢測時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗原）與固相載體表面的抗體反應(yīng)。洗滌后加入酶標(biāo)記的抗體，通過反應(yīng)結(jié)合在固相載體上。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。1.要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類似過
elisa測定試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的注意事項(xiàng)2023/05/15
ELISA是一種常用的生物化學(xué)分析技術(shù)，通常用于檢測特定蛋白質(zhì)或其他小分子化合物的存在。在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)中，標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品起到非常重要的作用。下面將介紹在進(jìn)行elisa測定試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品時需要注意的事項(xiàng)。1、樣品的制備在制備標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品時，應(yīng)遵循試劑盒使用說明書上的建議和方法。根據(jù)試劑盒中提供的不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品，制備一系列不同濃度的樣品。在制備樣品時，應(yīng)盡可能保持操作規(guī)范、精確和一致性。此外，應(yīng)注意控制樣品的儲存和運(yùn)輸條件，以避免影響樣品的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。2、試劑和設(shè)備的準(zhǔn)備在進(jìn)行ELISA
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的注意要點(diǎn)2023/05/11
ELISA試劑盒法兩種介紹：1、采用雙抗體二步夾心法測定標(biāo)本中各種動物相關(guān)指標(biāo)的水平。2、采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。進(jìn)口ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用需您用心對待，實(shí)驗(yàn)中主要注意到：1、滴加試劑前應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使液體混勻。滴加時瓶身應(yīng)保持垂直，以使滴量準(zhǔn)確。2、從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)在室溫環(huán)境中平衡30min后方可使用，未用完的微孔條用自封袋密封保存。3、所有樣品和廢棄物都應(yīng)按傳染源處理。終止液為2mol／L硫酸，使用時應(yīng)注意安全。4、若標(biāo)本OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線測定范圍以外，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重
按這個步驟操作植物ELISA試劑盒，既簡單又安全2023/05/08
在植物elisa試劑盒檢測中除了包被外，一般需進(jìn)行45加樣。在定性測定中有時不強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性，例如規(guī)定為加樣一滴。此時應(yīng)該使用相同口徑的滴管，保持準(zhǔn)確的加樣姿勢，使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時應(yīng)將液體加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出現(xiàn)氣泡。樣本處理：1、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)靈敏度高的原因2023/04/23
ELISA試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。ELISA試劑盒試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法分析：1選擇試劑選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2加樣可能原因：1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；2）手工操作中，加樣板過多造成
ELISA檢測試劑盒的功能特點(diǎn)2023/04/13
ELISA檢測試劑盒方便，操作簡單，對于實(shí)驗(yàn)器械試劑的要求不是很高，并且抗原抗體的結(jié)合與酶促反應(yīng)的結(jié)合，使其具有了高度特異性和高度靈敏性，優(yōu)點(diǎn)突出。ELISA檢測試劑盒的功能特點(diǎn)：1、高靈敏度由于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中免疫檢測和酶反應(yīng)的有機(jī)結(jié)合，抗原抗體結(jié)合的特異性與高效酶反應(yīng)的催化功能相結(jié)合，使得特異性和靈敏度被放大，使其具有高度特異性。2、高可操作性近年來，隨著分子生物化學(xué)的不斷發(fā)展，出現(xiàn)了越來越多的免疫學(xué)檢測方法。然而，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在免疫學(xué)檢測中始終占據(jù)一席之地的原因與ELISA試劑盒的高
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)常見問題總結(jié)2023/04/03
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)做了很多次，可是結(jié)果還是有偏差？可能很多同學(xué)都會出現(xiàn)這樣的問題，那么問題到底出在哪呢，今天小編就來給大家總結(jié)一下，ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中會經(jīng)常遇見的問題。一、ELISA試劑盒簡介酶聯(lián)免疫吸附測定是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù)。二、ELISA試劑盒的應(yīng)用1.免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2.研究抗酶抗體的合成。3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4.定量檢測體液中抗原或抗體成份。三、ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)疑難問題解答1.非正常的樣本值①不正確的收集或保存解決方案
ELISA試劑盒的樣本應(yīng)該如何準(zhǔn)備2023/04/03
ELISA試劑盒的樣本應(yīng)該如何準(zhǔn)備在收集樣本前都必須有一個完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本，及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本，及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的，最好-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、
ELISA試劑盒實(shí)踐過程中的一些技巧2023/03/29
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)看似簡單，其實(shí)不然。記得以前一個同學(xué)*次做ELISA實(shí)驗(yàn)，跟我說，ELISA實(shí)驗(yàn)簡直太簡單了，到第2次在次做ELISA實(shí)驗(yàn)的時候，他驚訝了，說結(jié)果差別怎么這么大（同一份標(biāo)本），第三次的時候，他決定認(rèn)真的做一次，爭取做到同一份標(biāo)本，這次讓他感受到ELISA并不是那么簡單，發(fā)覺其實(shí)挺難的。今天的文章中為大家講述一些ELISA實(shí)驗(yàn)中的小技巧，希望對大家有所幫助！1.操作前應(yīng)對實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等，要先查
ELISA實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)異常的原因分析2023/03/24
ELISA實(shí)驗(yàn)是我們大家最常見的實(shí)驗(yàn),也是比較容易出問題的實(shí)驗(yàn),可能你一不小心,你的整個實(shí)驗(yàn)便是無功能重來那!所以小編給您講解在使用ELISA試劑盒做實(shí)驗(yàn)的時候，有些細(xì)節(jié)若是做不好會出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)異常，或者效果不佳，那么你有想過是什么原因嗎？一、白板異常：顯色步驟結(jié)束后，酶標(biāo)板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。1.試劑已過效期，或不同試劑盒組分混用（解決方式：檢查試劑的組分及批號，確認(rèn)未過期以及所有組分均屬對應(yīng)的試劑盒。不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用）。2.錯加、漏加試劑底物、顯色劑A或B（解決方式
ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果為什么有時候會復(fù)測？2023/03/15
在ELISA實(shí)驗(yàn)過程中時常會出現(xiàn)復(fù)測現(xiàn)象即我們時常說的"花板"現(xiàn)象，這種現(xiàn)象影響檢驗(yàn)結(jié)果的正確判讀，對工作造成一定的不利影響，一旦出現(xiàn)“花板"，實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須放棄，重新進(jìn)行，不僅浪費(fèi)物料和時間，而且還會出現(xiàn)樣本量缺少、交叉污染、報告延遲等一系列問題。影響因素分析如下：一、標(biāo)本因素正確處理標(biāo)本，防止大規(guī)模溶血、血漿層異物、使用一次性加樣槍頭，防止交叉污染。血清和血漿均可以用于檢測，但血清的分離應(yīng)在抽血后等血液wan全凝固后再離心。二、試劑因素正確保存及使用有效試劑。使用過期試劑及底物接觸金屬容器、底
ELISA常用模式--競爭法測抗原2023/03/10
大分子抗原因其具有兩個以上的抗原決定簇，而可用雙抗體夾心法測定，小分子半抗原如di高辛、茶堿等藥物以及T3，T4及睪酮等激素因其只有一個抗原決定簇，從而無法使用雙抗夾心方法測定，只能采用競爭抑制法測定。具體步驟如下：1．先用抗小分子的特異抗體如雙抗體夾心法一樣包被固相并封閉。2．同時加入待測樣本和酶標(biāo)的小分子，溫育一定時間后洗板；此步中，待測樣本的小分子將與酶標(biāo)小分子競爭與固相上特異抗體結(jié)合。3．加入酶底物，溫育顯色測定，顯色的強(qiáng)弱與待測樣本中的小分子含量成反比。這種測定模式中，需要得到小分子與
影響ELISA實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果的因素2023/03/02
ELISA測定的陽性判斷值,通常是將大量陰性和陽性人群的測定數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后確定的,其確定依據(jù)為判斷結(jié)果的假陽性和假陰性率低。在陽性判斷值周圍一定范圍內(nèi)之外的測定結(jié)果可歸為可疑,亦即ELISA測定的“灰區(qū)"?！盎覅^(qū)"的大小可用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法確定。測定結(jié)果處于“灰區(qū)"的樣本,可通過確認(rèn)試驗(yàn)或追蹤檢測來確定到底是陽性還是陰性ELISA“灰區(qū)"是把定量分析的正常值范圍引入定性分析而建立的概念。灰區(qū)的設(shè)置有二種:(1)CO×(1±C),C為該試劑的批內(nèi)C(一般在15%～20%間);(2)CO±2S,S為做
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟2023/02/27
每一盒ELISA試劑盒里面都有一份對應(yīng)的說明書，而每一份說明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋比例，為什么樣本都需要稀釋呢?今天的文章中，將為您分析：為何ELISA實(shí)驗(yàn)血清樣本都需要稀釋?在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋？有兩個原因：1）競爭抑制比較明顯，應(yīng)稀釋競爭物；2）以降低非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。血清稀釋用普通的PBS即可，可加1％的BSA，能有效降低ELISA本底，當(dāng)然如果你嫌麻煩我覺得用生理鹽水替代PBS關(guān)系也不大。不管你是用直接競爭還是間接競爭，血清的稀釋
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)條件的選擇2023/02/27
在ELISA試劑盒中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。（2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋
熒光定量PCR試劑盒的操作步驟，快來學(xué)習(xí)下吧2023/02/23
熒光定量PCR試劑盒的操作步驟：1、取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其溶解。2、兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。3、RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12
ELISA試劑盒中通常有哪些加樣步聚2023/02/20
在ELISA試劑盒中通常有三次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶聯(lián)絡(luò)物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，散布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振動。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清天然凝聚、縮短后即可取得。ELISA試劑盒也可在板孔中參與稀釋液，然后在微型轟動器上轟動1分鐘以bao證混和。通常說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超越一星期測定的需低溫冰存?？捎米鱁LISA試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液
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