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北京西美杰科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第16年
使用Cygnus ELISA試劑盒該如何設(shè)置空白對(duì)照?2025/02/19
空白對(duì)照的定義及其在ELISA測(cè)定中的應(yīng)用空白對(duì)照是指在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中設(shè)置的一種陰性對(duì)照,旨在監(jiān)測(cè)非特異性背景信號(hào),并為基線吸光度值提供參考。在酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)中,通過引入空白對(duì)照,可以有效識(shí)別并扣除樣品讀數(shù)中的背景噪聲,從而提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。然而,在多分析物ELISA測(cè)定中,由于其固有的高背景信號(hào)特性,這種標(biāo)準(zhǔn)化方法可能并不適用。本文將詳細(xì)探討為何在Cygnus的ELISA測(cè)定中通常不建議使用空白對(duì)照。減去背景值對(duì)多分析物ELISA檢測(cè)結(jié)果的影響在多分析物ELISA測(cè)定中,如HC
HCP ELISA方法驗(yàn)證——加標(biāo)回收(Spike & Recovery)2024/12/26
前言在ELISA試劑盒的使用過程中,確保結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。為了有效識(shí)別樣品配方與試劑盒組分之間的兼容性,加標(biāo)回收這一關(guān)鍵驗(yàn)證試驗(yàn)顯得尤為重要。它不僅是評(píng)估ELISA試劑盒準(zhǔn)確性的重要工具,也是滿足法規(guī)和藥典(如ICH或FDA指南等)對(duì)商品化ELISA試劑盒方法學(xué)驗(yàn)證要求的可靠方式。什么是加標(biāo)回收?加標(biāo)回收就是將已知量的標(biāo)準(zhǔn)品添加到樣品中(“加標(biāo)”,spiking),通過對(duì)比加入前后的檢測(cè)結(jié)果,評(píng)估“回收”(recovery)測(cè)量值的準(zhǔn)確性。這一過程可以揭示樣品及其緩沖液中某些成分是否會(huì)干擾檢
抗體親和提取(AAE™):革新宿主細(xì)胞蛋白(HCPs)分析的新篇章2024/12/12
在生物制藥領(lǐng)域,對(duì)宿主細(xì)胞蛋白(HCPs)的精準(zhǔn)分析與控制是確保藥物安全與有效性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。各國(guó)法規(guī)都有關(guān)于HCPs的論述,要求必須對(duì)生物藥品進(jìn)行分析和純化,以將宿主細(xì)胞蛋白HCPs降低到可接受的水平。不同監(jiān)管機(jī)構(gòu)宿主細(xì)胞蛋白(HCPs)法規(guī)要求:《中國(guó)藥典》(2020版)三部規(guī)定:針對(duì)CHO細(xì)胞,HCPs殘留需要(相當(dāng)于小于500ppm);針對(duì)E.coli,HCP殘留需要。美國(guó)藥典USP章節(jié)規(guī)定:用一種靈敏度較高的方法檢測(cè)藥品中的HCPs,其含量應(yīng)該低于檢測(cè)限(通常小于100ppm,即1mg總
HCP ELISA方法驗(yàn)證——稀釋線性dilution linearity2024/11/27
前言HCPELISA檢測(cè)方法必須要通過法規(guī)認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)方法(ICH或FDA指南等)進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證,以確保其能夠產(chǎn)生準(zhǔn)確的結(jié)果。想要獲得準(zhǔn)確的HCPELISA檢測(cè)結(jié)果,本質(zhì)上是要保證樣品中HCP的濃度高于試劑盒的定量下限(LOQ),同時(shí)HCP的檢測(cè)抗體還要處于過剩狀態(tài),滿足這兩點(diǎn)就必須要對(duì)檢測(cè)樣品(過程樣品和最終的藥物原液)進(jìn)行稀釋線性驗(yàn)證。因此,稀釋線性(dilutionlinearity)是驗(yàn)證HCPELISA方法特異性和準(zhǔn)確性的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)之一。在HCP檢測(cè)中,稀釋線性不佳的原因主要有兩種:一種是
如何用正確的洗板方法解決ELISA檢測(cè)結(jié)果漂移的問題2024/09/18
正確的洗板操作對(duì)于降低ELISA實(shí)驗(yàn)中的變異和消除背景干擾至關(guān)重要。如果您正在使用自動(dòng)化洗板設(shè)備或?qū)嶒?yàn)結(jié)果的變異程度高于預(yù)期,希望以下文章和視頻能幫助您優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果回歸正常。手動(dòng)洗板的優(yōu)點(diǎn)雖然ELISA洗板的目的是去除未結(jié)合的反應(yīng)物,但過度洗板會(huì)不同程度上導(dǎo)致抗體與目標(biāo)蛋白解離,從而導(dǎo)致吸光值偏低和%CV值偏高。此外,殘留液體去除不完全(通常發(fā)生在自動(dòng)洗板設(shè)備中)也會(huì)導(dǎo)致更高的檢測(cè)背景,這些對(duì)HCPELISAs檢測(cè)尤為不利,因?yàn)槠浔旧砭途哂休^高的基線吸光值。因此,Cygnus專家建
白蛋白與白蛋白融合蛋白的親和層析純化2024/07/05
人血清白蛋白人血清白蛋白(HumanSerumAlbumin,HSA)是血漿中含量豐富的蛋白質(zhì),占血漿蛋白的40-60%,半衰期長(zhǎng)達(dá)20天,具有重要的生理學(xué)和藥理學(xué)功能,能維持血液正常的滲透壓,穩(wěn)定電解質(zhì)和酸堿平衡,參與物質(zhì)運(yùn)輸。在臨床上,人血清白蛋白一直被譽(yù)為“黃金救命藥”,主要用于手術(shù)輸血和危重病人的補(bǔ)液、治療創(chuàng)傷或燒傷引起的休克、治療低白蛋白血癥等。人血白蛋白(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))人血清白蛋白在臨床上使用量很大,通常每劑量高達(dá)10g。而市售的治療性人血白蛋白多數(shù)來源于血漿,經(jīng)冷乙醇沉淀、柱層析
蛋白結(jié)晶研究入門全攻略2024/05/11
蛋白質(zhì)結(jié)晶是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)鍵手段,對(duì)理解生物大分子作用、疾病機(jī)制及藥物開發(fā)至關(guān)重要。它涉及蛋白質(zhì)分子在溶液中規(guī)則堆積形成有序晶體的過程,受蛋白質(zhì)純度、濃度、緩沖液成分等多種因素影響。為獲高質(zhì)量晶體,需進(jìn)行樣品制備、條件篩選與優(yōu)化等。蛋白結(jié)晶研究推動(dòng)生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域發(fā)展,支持藥物設(shè)計(jì)和蛋白質(zhì)工程。本文概述了蛋白質(zhì)結(jié)晶的制備、方法、篩選、優(yōu)化等要點(diǎn),為相關(guān)研究提供參考。一蛋白質(zhì)晶體的發(fā)展史蛋白質(zhì)晶體的研究始于19世紀(jì)中期,Hunefeld首先報(bào)道了血紅蛋白晶體。到了20世紀(jì),結(jié)晶技術(shù)成為提
Mirus Label IT®高效一步法用于體內(nèi)和體外核酸標(biāo)記的新技術(shù)2024/04/10
細(xì)胞轉(zhuǎn)染在科學(xué)研究中扮演著十分重要的角色,但也是最容易被忽略的一環(huán)。轉(zhuǎn)染效率的高低不僅影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至可能導(dǎo)致得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是無(wú)效的。在多種類型核酸的細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中,研究者們常需要進(jìn)一步優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件以達(dá)到轉(zhuǎn)染效率,特別是較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,而針對(duì)特定細(xì)胞類型選擇對(duì)應(yīng)專業(yè)化的轉(zhuǎn)染試劑只是邁向轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)成功的第一步。成立于1995年的MirusBio,專注及深耕核酸遞轉(zhuǎn)領(lǐng)域多年,從最早具有低毒性的TransIT®-LT1到GMP級(jí)別、可用于AAV和LV生產(chǎn)的TransIT-VirusGEN®(產(chǎn)品年鑒請(qǐng)
介紹一種提高慢病毒回收率與純化效率的新技術(shù)2024/03/14
病毒載體技術(shù)的研究不斷深入和發(fā)展,為遺傳物質(zhì)遞送提供了理想的工具,成為目前細(xì)胞治療與基因治療的主要遞送技術(shù)。然而,研究人員在細(xì)胞基因治療產(chǎn)品的純化工藝方面卻面臨著重大挑戰(zhàn)。目前的純化工藝大都來源于為單克隆抗體開發(fā)的解決方案,不適合用于病毒載體的純化。而基于傳統(tǒng)樹脂色譜法有明顯的局限性,如回收率低、耗時(shí)且成本高。AstreAdept™是一種新型的納米纖維材料,可有效解決粒徑大且脆弱的病毒顆粒純化面臨的耗時(shí)長(zhǎng)、回收率低且雜質(zhì)含量高等問題。在這里,我們展示了該技術(shù)整合到離心管形式的NereusLent
熱烈慶祝西美杰正式代理Astrea Bioseparations品牌2024/02/01
英國(guó)AstreaBioseparations于1987年成立,公司前身是AffinityChromoatographyLtd,其從英國(guó)劍橋大學(xué)獨(dú)立出來專注于吸附填料的研發(fā)和生產(chǎn)。AstreaBioseparations公司兩大核核心技術(shù)(產(chǎn)品)Mimeticligand®和PuraBead®是公司產(chǎn)品的基石,迄今為止已有21個(gè)上市產(chǎn)品(FDA/EMA)使用AstreaBioseparations公司的產(chǎn)品用于商業(yè)化生產(chǎn),其中不乏跨國(guó)公司和新興生物技術(shù)公司。近年來,隨著CGT領(lǐng)域的興起,病毒載體的
Mirus全能型轉(zhuǎn)染試劑TransIT-X2®應(yīng)對(duì)多種核酸/蛋白及細(xì)胞類型2024/01/11
基于需要遞轉(zhuǎn)不同種類核酸/蛋白類型研究,在細(xì)胞轉(zhuǎn)染環(huán)節(jié),研究者們常碰到如下三類問題:細(xì)胞對(duì)化學(xué)試劑較為敏感,轉(zhuǎn)染后,細(xì)胞活率下降或死亡;研究常用細(xì)胞類型較多,不同類型細(xì)胞,轉(zhuǎn)染效率差異較大,導(dǎo)致單個(gè)轉(zhuǎn)染試劑或者實(shí)驗(yàn)流程,無(wú)法滿足實(shí)驗(yàn)需求;遞轉(zhuǎn)多種類型核酸或蛋白,需要挑選對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)染試劑,并且需要大量實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,才可以得到較高的轉(zhuǎn)染效率。有沒有一款化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,可以同時(shí)應(yīng)對(duì)常規(guī)到難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型,有著較低的細(xì)胞毒性,并且適用于多種核酸/蛋白類型遞轉(zhuǎn)呢?兼具多重功能、高性能的TransIT-X2®轉(zhuǎn)染試
西美杰幫您選擇植物組培抗生素2023/12/01
植物組織培養(yǎng)中一部分抗生素被用于去除或者抑制微生物生長(zhǎng),如青霉素、氯霉素、利福平等;另一部分用于抗性篩選的抗生素,如潮霉素B、G418、雙丙氨膦等,他們大多數(shù)能夠抑制或者干擾某些重要蛋白質(zhì)的合成,可以在含有這些抗生素的培養(yǎng)基中篩選得到目的植株的陽(yáng)性克隆。每種抗生素的抑菌譜不同,不同的植物對(duì)抗生素表現(xiàn)出不同的敏感性。例如,一種抗生素對(duì)某些植物的毒性很小,而對(duì)其他物種的毒性是極大的。所以沒有固定推薦的使用濃度,建議抗生素在使用之前,應(yīng)該對(duì)樣本相對(duì)于抗生素的敏感性進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),確定藥物使用最佳濃度和最佳
CHOgro® High Yield Expression系統(tǒng),高效、穩(wěn)步提升CHO細(xì)胞蛋白表達(dá)2023/10/20
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞,已成為治療用蛋白類生物制品生產(chǎn)的主要細(xì)胞類型。隨著瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù)(transienttransfection)的進(jìn)步,搭配CHO細(xì)胞進(jìn)行毫克至克級(jí)別蛋白的快速、高效生產(chǎn),幫助推動(dòng)藥物研發(fā)階段進(jìn)程,允許更早的評(píng)估候選藥物是否具備理想屬性,從而投入更多資源生成穩(wěn)定的克隆細(xì)胞系,用于后續(xù)藥物的臨床開發(fā)。憑借20年在核酸遞轉(zhuǎn)領(lǐng)域的深耕細(xì)作,Mirus推出了用于CHO細(xì)胞蛋白/抗體生產(chǎn)的完整瞬轉(zhuǎn)系統(tǒng)——CHOgro®HighYieldExpressionSystem。通過整合Mi
如何選擇合適的植物凝膠?2023/08/04
植物凝膠是植物組織培養(yǎng)過程中用來凝固培養(yǎng)基的物質(zhì),其自身一般不具有營(yíng)養(yǎng),作為固體支持物存在,一般在選用時(shí)考慮三個(gè)方面:1、使用方便;2、對(duì)培養(yǎng)植物不產(chǎn)生不利影響,不與培養(yǎng)基中其他組分例如抗生素發(fā)生反應(yīng);3、具有較好的透明度。目前比較常用的植物凝膠主要包括:瓊脂(Agar)、結(jié)冷膠(GellanGum)、卡拉膠(Carrageenan)等。瓊脂是一種天然產(chǎn)物,主要來自紅藻科的兩個(gè)屬:石花菜屬(Gellidium)和江籬屬(Gracillaria)。石花菜屬本身小且生長(zhǎng)緩慢,很難獲得,不經(jīng)濟(jì),但其來
Agrisera模式植物擬南芥蛋白抗體特惠活動(dòng)開始啦!2023/04/23
我們將生長(zhǎng)周期短,基因組小且常見于生物實(shí)驗(yàn)室的植物叫模式植物,擬南芥就是科學(xué)家們常用的科研對(duì)象,它是這個(gè)世界上研究得最透徹的物種。個(gè)體小的擬南芥只有五對(duì)染色體,基因組小,其基因組序列已于2000年由國(guó)際擬南芥基因組合作聯(lián)盟聯(lián)合完成,這是第一個(gè)實(shí)現(xiàn)全序列分析的植物基因組。短暫的生長(zhǎng)周期使它們擁有在短時(shí)間就能繁衍多代的功能,繁殖期的擬南芥每次都能產(chǎn)出數(shù)千枚種子,不占體積還可以大量繁殖和大量栽培,既滿足了科學(xué)家對(duì)研究植物變異和進(jìn)化的要求,又滿足了科學(xué)家對(duì)遺傳上統(tǒng)計(jì)的要求。且擬南芥是閉花自花傳粉,可以很
Agrisera植物氮代謝相關(guān)抗體開學(xué)季特惠活動(dòng)2023/03/09
氮素是植物生長(zhǎng)所必須的大量元素之一,植物吸收的氮主要是無(wú)機(jī)態(tài)氮,即NO3-或者NH4+,此外也可以吸收某些可溶性的有機(jī)氮化物,但植物不能直接把空氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為自身利用,一般在相關(guān)酶的作用下合成谷氨酰胺和谷氨酸,然后經(jīng)過轉(zhuǎn)氮作用形成不同的氨基酸,再合成蛋白質(zhì)。高效利用氮素對(duì)植物生長(zhǎng)有著重要意義,氮的高效利用與很多生理機(jī)制密切相關(guān),其中之一就是氮代謝過程中的關(guān)鍵酶。氮代謝是植物體內(nèi)的基本生理代謝過程之一,包括氮素同化、積累和蛋白質(zhì)合成等過程,與植物的生長(zhǎng)發(fā)育、產(chǎn)量和品質(zhì)的聯(lián)系非常密切。氮代謝的生理
熒光標(biāo)記二抗種類繁多,如何選擇?2022/08/04
一般來講,偶聯(lián)到二抗上的探針主要有酶(辣根過氧化酶HRP和堿性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),熒光基團(tuán)(FITC,RRX,TR,PE,Rhodamine)和生物素。選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實(shí)驗(yàn),對(duì)于WesternBlot和ELISA,常用的二抗是酶標(biāo)二抗;而細(xì)胞或組織標(biāo)記實(shí)驗(yàn)(細(xì)胞免疫化學(xué),組織免疫化學(xué),流式細(xì)胞術(shù))中通常使用熒光標(biāo)記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測(cè)信號(hào),可以使Biotin/Avidin檢測(cè)系統(tǒng)。其中熒光素是具有光致熒光特性的染料,熒光染料種類很多,目前常用
腫瘤治療理想靶點(diǎn)之LILRB2022/05/27
白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(Theleukocyteimmunoglobulin-likereceptors,LILRs)由抑制性LILR亞家族B(LILRB1-5)和激活性LILR亞家族A(LILRA1-6)組成。LILRB家族受體屬于I型跨膜糖蛋白,胞外區(qū)含有Ig樣結(jié)構(gòu)域,胞內(nèi)區(qū)含有免疫受體酪氨酸抑制基序(ITIM)結(jié)構(gòu)域,是免疫抑制性受體。LILRBs(LILRB1-5)主要在髓系細(xì)胞表達(dá),同時(shí)在腫瘤干細(xì)胞上也高表達(dá),并可能直接調(diào)控癌癥的發(fā)生和復(fù)發(fā)以及腫瘤干細(xì)胞的活性。LILRBs能抑制腫瘤免
PPM使用注意什么呢?2022/04/20
產(chǎn)品名稱:PPMTM-PlantPreservativeMixture(植物組織培養(yǎng)抗菌保護(hù)劑)貨號(hào):PPM保存條件:4oC運(yùn)輸條件:常溫物理性質(zhì):溶液性狀:無(wú)色至琥珀色透明液體pH值:3.8有效期:見瓶身標(biāo)簽說明產(chǎn)品描述:PPMTM是一種熱穩(wěn)定的抗菌劑,用于植物組織培養(yǎng)中植物的微生物污染防治與清除;在合理的使用劑量下,PPMTM是一種非常有效的植物組培抗菌劑與保護(hù)劑,不會(huì)對(duì)植物的生長(zhǎng)(如種子萌發(fā),愈傷增殖、再生等)產(chǎn)生任何影響,可視為培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)配方成份;PPMTM主要用于預(yù)防和消除來自空氣、水
如何測(cè)定免疫后中和抗體2022/03/17
隨著后疫情時(shí)代的到來,國(guó)內(nèi)外的疫苗接種率在不斷提升,先后多家新冠疫苗獲批上市,包括滅活病毒苗、亞單位疫苗及重組腺病毒表達(dá)疫苗,目前獲批附條件上市的國(guó)產(chǎn)新冠疫苗公布的保護(hù)效力數(shù)據(jù)結(jié)果,均達(dá)到世界衛(wèi)生組織相關(guān)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)國(guó)家技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。世界衛(wèi)生組織2月25日公布的最新數(shù)據(jù)顯示,全球已接種超過100億劑疫苗;據(jù)國(guó)家衛(wèi)生健康委消息,截至2022年2月28日,31個(gè)省(自治區(qū)、直轄市)和新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)累計(jì)報(bào)告接種312984.5萬(wàn)劑次。疫苗接種后的效果如何以及如何評(píng)價(jià)也成為了大家關(guān)注的焦點(diǎn)。中和抗體免疫
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