在GSH指標的測定中,我們發(fā)現(xiàn)空白管和標準管的測定數(shù)值和說明書當中給出的數(shù)值是比較一致的,但是測定管的數(shù)值比說明書中給出的A=0.123左右大,有A=0.420左右。這個數(shù)值是否在一個比較合理的范圍內呢?因為用的是10%的試樣,如果吸光度值太大,是否需要將樣品進行稀釋后再測定呢?
另外需要指出的是,在GSH酶促反應后,離心10min以后我們發(fā)現(xiàn)上清液里面還是有一些渾濁物,怕影響吸光度值的測定。所以在第二次的預實驗中我們增大了離心的轉速到6000轉,但測出的數(shù)值也并沒有減小。綜合考慮,我們是否需要將樣品進行稀釋后再測定呢?
還有我想問一下,GSH,GST,GPx試劑盒中標準品應用液是否一樣呢?在指標測定中是否可以混用呢?
回復:
GSH的測定,線性很好,只要測定吸光度在1.0以下,都不會超出試劑盒的測定范圍!
GSH沒有酶促反應,只有樣本前處理和測定,如果是GST,酶促反應后,主要是離心沉淀蛋白取上清進行顯色反應,所以離心轉速可以提高,不影響結果!
GSH、GSH-ST、GSH-PX中的GSH標準粉劑是一致的,可以用!
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