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動(dòng)物實(shí)驗(yàn)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

來源:上海乾思生物科技有限公司   2015年07月01日 20:35  

關(guān)鍵詞:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
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測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:
一、分組
(一)   分組原則
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組應(yīng)嚴(yán)格按照隨機(jī)分組的原則進(jìn)行,使每只動(dòng)物都有同等機(jī)會(huì)被分配到各個(gè)實(shí)驗(yàn)組中去,盡量避免人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)造成的影響。
(二)   建立對(duì)照組
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組時(shí)應(yīng)特別注意建立對(duì)照組。對(duì)照組可分自身對(duì)照組和平行對(duì)照組。
1.自身對(duì)照組
自身對(duì)照是把實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本身在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前、后兩階段的各項(xiàng)相關(guān)數(shù)據(jù),分別作為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的結(jié)果并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
2.平行對(duì)照組
平行對(duì)照組分正對(duì)照組和負(fù)對(duì)照組(空白對(duì)照組)兩種。正對(duì)照組是對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)施與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相同但排除了所要觀察的目的因子(如治療手段或藥物)的處理,負(fù)對(duì)照組則不作任何處理,這種方法就是平行對(duì)照組。
二、標(biāo)記編號(hào)
對(duì)隨機(jī)分組后的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行標(biāo)記編號(hào),是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作中相當(dāng)重要的一項(xiàng)工作。標(biāo)記編號(hào)方法應(yīng)保證編號(hào)不對(duì)動(dòng)物生理或?qū)嶒?yàn)反應(yīng)產(chǎn)生影響,且號(hào)碼清楚、易認(rèn)、耐久和適用。目前常用的標(biāo)記編號(hào)方法有染色法、耳孔法、烙印法、掛牌法等標(biāo)記編號(hào)方式。此外還有針刺法、斷趾編號(hào)法、剪尾編號(hào)法、被毛剪號(hào)法、籠子編號(hào)法等。
(一)染色法
染色法是用化學(xué)藥品在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身體明顯的部位,如被毛、四肢等處進(jìn)行涂染,以染色部位、顏色不同來標(biāo)記區(qū)分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,是zui常用、zui易掌握的經(jīng)濟(jì)犯罪分子方法。
1.  常用染色劑
     (1)3% ~ 5%苦味酸溶液,可染成黃色。
(2)0.5% 中性紅或品紅溶液,可染成紅色。
(3)2%硝酸銀溶液,可染成咖啡色(涂染后在可見光下暴露十分鐘)。
(4)煤焦油酒精溶液,可染成黑色。
2.  染色方法
染色法適用于被毛白色的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如大白鼠、小白鼠等。
(1)單色涂染法
單色涂染法是用單一顏色的染色劑涂染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不同部位的方法。常規(guī)的涂染順序是從左到右、從上到下。左前肢為1號(hào)、左側(cè)腹部2號(hào)、左后肢3號(hào)、頭部4號(hào)、背部5號(hào)、尾根部6號(hào)、右前肢為7、右側(cè)腹部8號(hào)、右后肢9號(hào)、不作染色標(biāo)記為10號(hào)。此法簡(jiǎn)單、易認(rèn),在每組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不超過10只的情況下適用。
(2)色涂染法
雙色涂染法是采用兩種顏色同時(shí)進(jìn)行染色標(biāo)記的方法。例如用苦味酸(黃色)染色標(biāo)記作為個(gè)位數(shù),用品紅(紅色)染色標(biāo)記作為十位數(shù)。個(gè)位數(shù)的染色標(biāo)記方法同單色涂染法;十位數(shù)的染色標(biāo)記方法參照單色涂染法,即左前肢為10號(hào)、左側(cè)腹部20號(hào)、左后肢30號(hào)、頭部4 0號(hào)、背部50號(hào)、尾根部60號(hào)、右前肢70號(hào)、右側(cè)腹部80號(hào)、右后肢90號(hào),第100號(hào)不作染色標(biāo)記。比如標(biāo)記第12號(hào)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,在其左前肢涂染品紅(紅色),在其左側(cè)腹部涂上苦味酸(黃色)即可。雙色法色法可標(biāo)記100位以內(nèi)的號(hào)碼。
(3)直接標(biāo)號(hào)法
直接標(biāo)號(hào)法是使用染色劑直接在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛、肢體上編寫號(hào)碼的方法。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物太小或號(hào)碼位數(shù)太多時(shí),不宜采用此方法。
染色法雖然簡(jiǎn)單方便,不會(huì)給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成損傷和痛苦,但是長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)會(huì)使涂染劑自行褪色,或由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物互相嬉鬧、舔毛、摩擦、換毛、糞尿和飲水浸濕被毛等原因,易造成染色標(biāo)記模糊不清,因而染色法對(duì)慢性實(shí)驗(yàn)不適用。如果所做慢性實(shí)驗(yàn)只能采用此種染色方法,則應(yīng)注意不斷地補(bǔ)充和加深染色。
另外,常用染色劑的毒性對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響也是需要注意的一個(gè)問題。
(二)   孔法
耳孔法是用打孔機(jī)直接在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳朵上打孔編號(hào),根據(jù)打在動(dòng)物耳朵上的部位和孔的多少,來區(qū)分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的方法。用打孔機(jī)在耳朵打孔后,必須用消毒過的滑石粉抹在打孔局部,以免傷口愈合過程中將耳孔閉合。耳孔法可標(biāo)記三位數(shù)之內(nèi)的號(hào)碼。另一種耳孔法是用剪刀在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳郭上剪缺口的方法,作為區(qū)分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)記。
(三)烙印法
烙印法是直接把標(biāo)記編號(hào)烙印在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身體上的方法,尤如蓋印章一樣。烙印方法有兩種,對(duì)犬等大動(dòng)物,可將標(biāo)記號(hào)碼烙印在其皮膚上(如耳、面、鼻、四肢等部位),對(duì)家兔、豚鼠等動(dòng)物,可用數(shù)字號(hào)碼鉗在其耳朵上刺上號(hào)碼;烙印完成后,傷口涂抹酒精黑墨等顏料,即可清楚讀出號(hào)碼。烙印法對(duì)實(shí)驗(yàn)成績(jī)動(dòng)物會(huì)造成輕微損傷,操作時(shí)宜輕巧、敏捷,必要時(shí)麻醉,以減少痛苦。
(四)掛牌法
掛牌法是將編好的號(hào)碼烙印在金屬牌上,掛在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物頸部、耳部、肢體或籠具上,用來區(qū)別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一種方法。金屬牌應(yīng)選用不生銹、刺激小的金屬材料,制成輕巧、美觀的小牌子。
實(shí)驗(yàn)人員可根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種、實(shí)驗(yàn)類型及實(shí)驗(yàn)方式,選擇合適的標(biāo)記編號(hào)方法。一般來說,大、小鼠多采用染色法,家兔宜使用耳孔法,犬、猴、貓較適合掛牌法,犬還可用烙印法。

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