如今的生物技術(shù)領(lǐng)域中，微生物和真核細(xì)胞作為特定的供試菌株、藥品成分有著越來越重要的意義了。設(shè)想一下，1928年，若不是Alexander Flemming醫(yī)生偶然從細(xì)菌產(chǎn)生的黃青霉中發(fā)現(xiàn)了青霉素，我們難以想象今天會(huì)是怎樣的世界。

目前，藥品生產(chǎn)領(lǐng)域以每年大約9620億美元（2012年數(shù)據(jù)）的銷售額而躍居為當(dāng)今舉足輕重的工業(yè)領(lǐng)域。此領(lǐng)域提供的醫(yī)藥產(chǎn)品是人們?nèi)粘Ｉ钪械谋匦杵?，并像其他工業(yè)產(chǎn)品一樣分為常規(guī)藥品和有規(guī)定的特殊藥品。但由于藥品的使用對(duì)象是人類或動(dòng)物，它們被列為“特殊類型物資”，有著特殊的待遇。

圖1. Sterisart NF無菌檢測(cè)系統(tǒng)的泵包括顯示屏和條碼掃描儀，它可在無菌測(cè)試中輸送所需的介質(zhì)

▇ GMP管理規(guī)范監(jiān)管下的藥品生產(chǎn)

日常使用的眼藥水很易受到銅綠假單胞菌的污染，比如，1968年在瑞典發(fā)生的眼藥水污染事件，使用了受污染的眼藥水后人們的視力明顯降低，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致失明。如果病原體（細(xì)菌、病毒、真菌、寄生蟲）成功進(jìn)入血液并不斷繁殖，則被稱為敗血癥，這是病原體或其毒素對(duì)人體免疫系統(tǒng)報(bào)復(fù)。

因此在藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范GMP中規(guī)定了藥品生產(chǎn)企業(yè)的義務(wù)，質(zhì)量保證和質(zhì)量管理部門采取一定的措施來保證藥品的安全可靠性。

GMP的內(nèi)容不僅涉及到藥品本身，也涉及到藥品的生產(chǎn)、包裝和藥品檢驗(yàn)以及供貨中所有的原材料，包括了機(jī)床設(shè)備和儀器儀表。GMP規(guī)范的核心是人：人的衛(wèi)生、人的素質(zhì)。藥品生產(chǎn)過程中重要的就是要把微生物的污染降低到低程度，終產(chǎn)品藥微生物污染的在線監(jiān)控和殺菌是佳的，也是藥品生產(chǎn)基本的組成部分。

Sartorius就是這樣一個(gè)為制藥企業(yè)提供專業(yè)產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)的企業(yè)，他們認(rèn)為產(chǎn)品的質(zhì)量和安全可靠性和是藥品生產(chǎn)的重中之重。而藥品生產(chǎn)的質(zhì)量監(jiān)控也為藥品生產(chǎn)企業(yè)提供了可靠的解決方案。該公司提供的藥品生產(chǎn)質(zhì)量監(jiān)控產(chǎn)品包括了從分析天平開始到純凈水制造系統(tǒng)、吸液管和耗材，還包括領(lǐng)域中的創(chuàng)新產(chǎn)品。

比如：Microsart filter濾器、 Mycoplasmen檢測(cè)試劑盒和空氣采樣器。在注射藥物終產(chǎn)品的無菌測(cè)試中也有像Sterisart NF這樣的產(chǎn)品。

圖2. 集成式的條碼掃描儀方便了Sterisart NF無菌檢測(cè)系統(tǒng)原始包裝條碼的掃描和記錄

▇ 注射藥物正確的無菌測(cè)試

對(duì)注射、輸液或者移植到人、動(dòng)物體內(nèi)的藥品的無菌測(cè)試有著非常高的要求。無菌檢驗(yàn)是關(guān)系到整批次產(chǎn)品是否合格的決定性評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。終產(chǎn)品的無菌檢測(cè)既可由來完成，也可由具有認(rèn)證資質(zhì)的獨(dú)立第三方來完成。

根據(jù)藥典（USP<71>， EP2.6.1， JP4.06， WHO QAS/11.413 final），無菌檢測(cè)不僅適用于注射藥物，也適用于眼藥水、軟膏、護(hù)膚霜、噴霧藥劑和固體形式的外科縫合材料。無菌測(cè)試樣本中微生物的培育方法早在1930年就已經(jīng)出現(xiàn)了。需要檢測(cè)的藥用產(chǎn)品不是按照USP<71>或者EP2.6.1進(jìn)行過濾，采用的方法是在沒有其他可能性的情況下直接“接種”微生物。

無菌測(cè)試是在受控的無菌環(huán)境中進(jìn)行的，既可在具有潔凈室等級(jí)*的隔離室中進(jìn)行，也可在潔凈室等級(jí)*的實(shí)驗(yàn)室中潔凈室等級(jí)B級(jí)的環(huán)境中進(jìn)行。應(yīng)規(guī)定好無菌測(cè)試過程中關(guān)鍵區(qū)域，避免交叉污染，保證微生物不會(huì)影響無菌測(cè)試過程。

在環(huán)境條件的監(jiān)控中要選擇一些合適的方法，例如利用MD8 Airscan臺(tái)式浮游菌采樣儀在不干擾潔凈室保護(hù)區(qū)的情況下主動(dòng)采集空氣樣本。在要求特別嚴(yán)格的區(qū)域內(nèi)，例如在灌裝、隔離室或在吹瓶-灌裝-密封系統(tǒng)的區(qū)域內(nèi)，用戶對(duì)GMF明膠濾膜很高的病毒、微生物濾除和回收率很有信心。無菌測(cè)試對(duì)系統(tǒng)、材料以及執(zhí)行無菌檢測(cè)人員的要求也很高，訓(xùn)練有素的實(shí)驗(yàn)員很有必要。

圖3. Sterisart NF無菌檢測(cè)系統(tǒng)的Septum變型也可以用于無菌測(cè)試，圖示的變型就是一種短雙針、可自動(dòng)無菌通風(fēng)的安全平臺(tái)式的變型

▇ 無菌測(cè)試應(yīng)注意些什么？

首先要弄清楚醫(yī)藥產(chǎn)品銷售國(guó)的有關(guān)規(guī)定，這是進(jìn)行無菌測(cè)試的前提條件。例如：幾乎在所有國(guó)家里無菌測(cè)試都是在兩種介質(zhì)、兩個(gè)培養(yǎng)皿組成的系統(tǒng)中進(jìn)行的。但在中國(guó)則必須使用三皿的變型系統(tǒng)進(jìn)行無菌測(cè)試的菌株培育。

早在1975年時(shí),席勒系統(tǒng)在德國(guó)非常，甚至在歐洲也得以普及。但它卻因?yàn)榻M裝耗時(shí)多、易出現(xiàn)假陽性結(jié)果等不被美國(guó)、日本等國(guó)接受。

對(duì)于無菌測(cè)試的步驟有明確規(guī)定：需要有符合潔凈室質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的壓縮空氣源，例如：蠕動(dòng)泵負(fù)責(zé)將膜濾后的分析液輸送到無菌檢測(cè)單元中去；經(jīng)膜濾設(shè)備（標(biāo)準(zhǔn)過濾精度0.45μm）過濾后，病菌都被截留在系統(tǒng)外；抗生素和其他生長(zhǎng)抑制劑成分也可以輕松地被清除掉。

若被測(cè)藥品為粉末，則應(yīng)先溶解后檢測(cè)，然后密封好兩個(gè)培育皿，添加合適的營(yíng)養(yǎng)液，檢測(cè)好氧菌時(shí)加入CASO，檢測(cè)厭氧菌時(shí)添加流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基。允許使用的沖洗器可以在USP<71>中查閱。一般情況下沖洗器或盛放產(chǎn)品的隔膜需要多次被刺穿，要注意針頭足夠鋒利。

為使無菌測(cè)試過程符合GMP管理規(guī)范要求，測(cè)試過程中所使用的所有元器件，包括無菌測(cè)試系統(tǒng)，都要有批量可追朔性；好是每一件包裝的條碼都可以掃描識(shí)讀，把數(shù)據(jù)按照“聯(lián)邦法規(guī)”（21CFR Part 11）的規(guī)定保存為PDF格式的文件。

圖4. Sterisart NF無菌檢測(cè)系統(tǒng)的Septum變型可以完成從培育容器中無菌取樣的操作，*交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)

▇ 無菌制劑的安全可靠性

在檢測(cè)的無菌制劑時(shí)，Sartorius公司研發(fā)了終檢驗(yàn)用的Sterisart NF 一次性檢測(cè)系統(tǒng)，它是封閉的、一次性使用的系統(tǒng)，可完成袋、注射器、瓶、安瓿和粉末的無菌檢測(cè)，其基本原理是膜過濾技術(shù)。研發(fā)SterisartNF系統(tǒng)的目標(biāo)是：實(shí)現(xiàn)可重復(fù)再現(xiàn)的可靠結(jié)果，避免出現(xiàn)假陽性和假陰性檢測(cè)結(jié)果。

經(jīng)過14天的交叉污染培育或產(chǎn)品變型后，可將無菌樣本從培養(yǎng)皿取出或加入營(yíng)養(yǎng)液（如青霉素酶抑制抗生素）。如今，提取大多數(shù)都是通過穿刺針刺穿軟管、然后用滴液管加入溶液來完成的。這樣，不僅交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)提高了，且實(shí)驗(yàn)員被針頭誤傷的幾率也變高了。利用Septum版的Sterisart NF無菌檢測(cè)系統(tǒng)可明顯降低提取過程中的風(fēng)險(xiǎn)，方便提取操作。

Septum技術(shù)在醫(yī)藥領(lǐng)域得到了廣泛的認(rèn)可，并成功被推廣應(yīng)用。Septum系統(tǒng)可以用封口帽密封起來，必要時(shí)可用沾有異丙醇的濕巾擦拭。USP<71>建議：“...開始培育14天后，將一定份額（不少于1ml的介質(zhì)）注入有營(yíng)養(yǎng)液的新容器中...?！边@里的液體提取轉(zhuǎn)移過程可用Septum版的無菌檢測(cè)系統(tǒng)可靠、安全的完成。

液體轉(zhuǎn)移可利用申請(qǐng)保護(hù)的雙針來實(shí)現(xiàn)。這種不銹鋼材料制成的雙針非常鋒利，在穿刺Septum系統(tǒng)時(shí)非常省力；另一方面，與傳統(tǒng)的單針相比較它的使用操作也非常方便，因?yàn)樗鼰o需使用單獨(dú)的通風(fēng)過濾器。

Sterisart NF無菌檢測(cè)系統(tǒng)的泵可以有效的幫助完成被測(cè)產(chǎn)品向無菌檢測(cè)系統(tǒng)中的液體轉(zhuǎn)移過程中。系統(tǒng)中集成的條碼掃描儀可使用戶輕松完成所有無縫連接的可追朔記錄。例如完成所有介質(zhì)、Sterisart NF無菌檢測(cè)系統(tǒng)的連接。

這種泵的一個(gè)重要特點(diǎn)就是：它是按照潔凈室使用條件設(shè)計(jì)的。泵表面使用的是316L號(hào)不銹鋼材料，可在純凈工作臺(tái)上使用，也可集成在隔離室中使用。

除了H2O2兼容性之外，它的每個(gè)零部件都有很好的抗紫外線照射消毒和耐高壓消毒的能力。這對(duì)于超凈工作臺(tái)上來說是很有必要的。這一滿足GMP藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范要求的Sterisart NF泵是全封閉的，一條通風(fēng)換氣的縫隙都沒有。

▇ 無菌測(cè)試

無菌測(cè)試既可在（B級(jí)潔凈室內(nèi)的）*潔凈室也可在滿足*潔凈室等級(jí)規(guī)定的隔離室中進(jìn)行。如今，大多數(shù)測(cè)試都是在隔離室中完成的。其優(yōu)點(diǎn)是：隔離室中完成的測(cè)試結(jié)果具有可靠性，而且相比在超凈工作臺(tái)完成的產(chǎn)品，無菌制劑通過認(rèn)證的可能性較大。當(dāng)然，可靠的無菌測(cè)試也要求實(shí)驗(yàn)人員具有高素質(zhì)。