關(guān)鍵詞:單抗定制技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌單抗定制技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
單抗定制技術(shù)服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設(shè)計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時,我們也會提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復(fù)實驗。另一方面,我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復(fù)我們的實驗結(jié)果。
產(chǎn)品品牌: http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>單克隆抗體(單抗)應(yīng)用淋巴細胞雜交瘤技術(shù)將免疫動物的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞,通過HAT篩選,ELISA抗體檢測,有限稀釋克隆化,選擇出具有分泌抗體功能又能無限繁殖的來源于單一B細胞的雜交瘤細胞,并產(chǎn)生抗體,就是單克隆抗體。單抗的zui大優(yōu)勢是它的特異性、均一性、性和無限供應(yīng)性。在免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和臨床醫(yī)學(xué)上,包括對疾病(包括癌癥)的診斷、預(yù)防和治療等方面,均顯示出巨大的生命力。
實驗步驟:
1. 每種抗原免疫5只Balb/c小鼠
2. 選取ELISA效價較高的小鼠,取脾細胞與SP2/0細胞融合
3. 進行2~4次克隆化及ELISA篩選,確保雜交瘤細胞分泌抗體的穩(wěn)定性
4. 抗體亞類鑒定
5. 至少選擇2株雜交瘤細胞的凍存,并免費提供一年的保種服務(wù)
細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
細胞凍存:液氮凍存(基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS
細胞運輸:干冰運輸(1 Vial)或活細胞運輸(T-25 flasks
細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療詳細介紹
細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。
所有細胞入庫之前均經(jīng)過嚴格的細胞質(zhì)量檢測和鑒定
所有細胞在出庫之前均經(jīng)過一次嚴格的質(zhì)檢認證
確保細胞到每一位用戶手里都是狀態(tài)
高質(zhì)量ATCC產(chǎn)品對您的研究非常重要
1.細胞形態(tài)觀察。細胞膜是每天必須觀察的,看是否清晰,細胞的死亡往往是從細胞膜的破裂開始的,早期的表現(xiàn)就是細胞膜某一點出現(xiàn)欠完整或者毛發(fā)影。
2.細胞往往會有“抱團”現(xiàn)象,抱團生長或死亡,個人認為應(yīng)該勤換液或傳代,盡量避 免細胞抱團。
3.細胞生長迅速,強烈建議用較大的培養(yǎng)瓶養(yǎng),用小瓶養(yǎng)的話,換液不及時,很容易死 亡。細胞的生長速度一般為2天左右就需要傳代,并且一般為一傳三,或一傳四。
4.培養(yǎng)液:1640培養(yǎng)液,1L一般加碳酸氫鈉2g,并加雙抗,胎牛血清濃度*為12%,zui低 不低于10%,HL60細胞對胎牛血清高度依賴。培養(yǎng)液PH應(yīng)調(diào)為7.20-7.40之間。
5.防污染。HL60細胞生長迅速,較少發(fā)生污染,但常規(guī)措施應(yīng)該做好。比如無菌操作,酒精 消毒等,培養(yǎng)瓶口建議過火,包括瓶蓋,應(yīng)過火4秒左右。
6.凍存。-20一小時,-80液氮長期保存。強烈建議液氮長期保存,盡量不要在-80長期 保存,死亡率很高。
7.復(fù)蘇。調(diào)節(jié)水浴箱溫度為42℃,并提前在試管內(nèi)放置10倍培養(yǎng)液,使培養(yǎng)液溫度與室溫一 致。1分鐘內(nèi)融化細胞(禁止搖晃凍存管),移取至試管內(nèi),動作要輕,從試管管底開始慢慢上提 移液管,使細胞在培養(yǎng)液內(nèi)分布均勻,離心,洗2次。
收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。 (一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個 瓶消毒后放到超菌 臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開血管平滑肌細胞瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下 10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中, 倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將 培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30 秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分 散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶, 細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6 傳代;2~3天1次。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細 胞不適應(yīng)而造成生長不好。
凍存方法:凍存液:基礎(chǔ)培養(yǎng)基 +5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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