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鯉魚(yú)卵黃蛋白原ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素

來(lái)源:北京雅安達(dá)生物技術(shù)有限公司   2014年10月31日 10:01  

鯉魚(yú)卵黃蛋白原ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運(yùn)

 

1鯉魚(yú)卵黃蛋白原ELISA試劑盒嚴(yán)重溶血,以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽(yáng)性; 
2)混有紅細(xì)胞的血清 易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;
3)如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng); 
4)標(biāo)本凝固不全,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA 測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果; 
5)采血試管洗滌不*、反復(fù)使用易交叉污染; 
6)塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。 
ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD+23SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以PN值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于21為陽(yáng)性;PN值小于21,但大于15為可疑;PN小于15為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

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