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液相色譜儀的維護(hù)保養(yǎng)及氣泡問(wèn)題的處理

來(lái)源:杭州庫(kù)侖科技有限公司   2014年02月21日 13:25  
     液相色譜儀的維護(hù)保養(yǎng): 
  1.HPLC的日常操作條件:
  溫度:10—30℃;
  相對(duì)濕度<80%;
  是恒溫、恒濕,遠(yuǎn)離高電干擾、高振動(dòng)設(shè)備。
  2.泵的保養(yǎng):
  1)使用流動(dòng)相盡量要清潔;
  2)進(jìn)液處的沙芯過(guò)濾頭要經(jīng)常清洗;
  3)流動(dòng)相交換時(shí)要防止沉淀;
  4)避免泵內(nèi)堵塞或有氣泡;
  3.進(jìn)樣器的保養(yǎng):
  1)每次分析結(jié)束后,要反復(fù)沖洗進(jìn)樣口,防止樣品的交叉污染;
  4.柱的保養(yǎng):
  1)柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強(qiáng)烈震動(dòng);
  2)當(dāng)柱子和色譜儀聯(lián)結(jié)時(shí),閥件或管路一定要清洗干凈;
  3)要注意流動(dòng)相的脫氣;
  4)避免使用高粘度的溶劑作為流動(dòng)相;
  5)進(jìn)樣樣品要提純;
  6)嚴(yán)格控制進(jìn)樣量;
  7)每天分析工作結(jié)束后,要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品;
  8)每天分析測(cè)定結(jié)束后,都要用適當(dāng)?shù)娜軇﹣?lái)清洗柱;
  9)若分析柱長(zhǎng)期不使用,應(yīng)用適當(dāng)有機(jī)溶劑保存并封閉;
  5.檢測(cè)器(UV)的保養(yǎng):
  1)紫外燈的保養(yǎng):在分析前、柱平衡得差不多時(shí),打開(kāi)檢測(cè)器;在分析完成后,馬上關(guān)閉檢測(cè)器。
  2)樣品池要保養(yǎng)。
  液相色譜儀在使用中整個(gè)液路系統(tǒng)有兩個(gè)地方易產(chǎn)生氣泡:
  1、泵頭吸液白管。
  2、檢測(cè)口流通池。
  氣泡產(chǎn)生的原因:溫度上升,壓力下降!
  溫度上升或柱溫上升,當(dāng)接近試劑沸點(diǎn)時(shí),試劑汽化產(chǎn)生氣泡,試劑中已含微小氣泡,因加熱變大而產(chǎn)生氣泡。
  壓力下降產(chǎn)生氣泡,流動(dòng)相中一直包含微小氣泡,無(wú)論超聲過(guò)濾,均不能池底去掉它,那么當(dāng)壓力下降時(shí),微小氣泡將長(zhǎng)大,且多個(gè)小氣泡易聚集成大氣泡,而影響正常實(shí)驗(yàn)。
  下面分部位說(shuō)明氣泡產(chǎn)生原因及解決辦法:
  一、泵頭及吸液白管。
  1、泵頭:泵頭是壓力變化zui劇烈的地方,也是zui易產(chǎn)生氣泡的地方,泵頭靠負(fù)壓而吸液,而負(fù)壓必然使流動(dòng)相中的小氣泡長(zhǎng)大,當(dāng)泵腔變正壓時(shí),已長(zhǎng)大的氣泡未必能全部變小流入后續(xù)液路,則泵腔內(nèi)將積存氣泡,從而影響吸液精度,鑒于此,泵頭上專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)了排氣閥,便于泵頭排氣,觀察柱壓穩(wěn)定了說(shuō)明泵頭排氣成功。
  2、吸液白管長(zhǎng)氣泡。
  a、吸液白管接觸空氣部位漏氣,產(chǎn)生可見(jiàn)氣泡,吸液白管是常壓和負(fù)壓交臂變化部位,其漏表現(xiàn)為大氣進(jìn)入白管內(nèi),而不易見(jiàn)到管內(nèi)液體漏出。
  處理方法:更換白管。
  b、濾頭堵:濾頭堵使得液體流入濾頭的速度下降,泵強(qiáng)制吸液而產(chǎn)生真空氣泡。
  判斷:拔掉濾頭不再長(zhǎng)氣泡則是濾頭堵。
  處理:A、30%硝酸水液超洗濾頭,20分鐘左右。
  B、水超洗濾頭,注意換水多超幾次。
  c、流動(dòng)相汽化產(chǎn)生氣泡。
  尤其是夏天室溫高,沸點(diǎn)低的試劑易汽化,比如:乙酸,**,氨水,石油醚等易于汽化。
  處理:超聲,降室溫。
  二、檢測(cè)流通池長(zhǎng)氣泡。
  流通池是易積存氣泡的地方,其對(duì)基線影響巨大,流動(dòng)相流入色譜柱后,壓力越來(lái)越小,微小氣泡將逐漸長(zhǎng)大,而流通池截面積遠(yuǎn)大于鋼管面積,則氣泡在池內(nèi)易長(zhǎng)大,氣泡的特點(diǎn)是長(zhǎng)大在無(wú)外壓的情況下,很難縮小到鋼管內(nèi)經(jīng)以下流出流通池,所以它就存在了池內(nèi)。
  處理方法:1、對(duì)于示差檢測(cè)器(示差檢測(cè)器池只能耐幾個(gè)公斤壓力),只能是反復(fù)沖洗斥資,舉高廢液瓶靠廢液管內(nèi)液柱給池加一個(gè)微小反壓,所以這就靠成了示差池子排氣困難些,但無(wú)它法。
  三、我公司紫外檢測(cè)器池內(nèi)氣泡排除,當(dāng)基線很亂,無(wú)規(guī)則時(shí),應(yīng)考慮池子排氣泡。
  1、反復(fù)調(diào)節(jié)反壓器壓力,直至基線穩(wěn)定。
  2、手工排氣泡步驟。
  a、取下反壓器,接上備用鋼管。
  b、泵吸液,檢測(cè)器調(diào)零。
  c、在現(xiàn)柱壓基礎(chǔ)上加一個(gè)50KG壓力上限保護(hù),比如,現(xiàn)柱壓60KG,pmax設(shè)壓力上限110KG即可。(我公司紫外池子可耐150KG壓力加50KG保護(hù)可保證池子不會(huì)損壞)。
  d、手堵廢液鋼管出液端,眼看泵柱壓上升,且同時(shí)看檢測(cè)器顯示屏上AV值的變化。
  如果池內(nèi)有氣泡,則手堵廢液管,AN值將劇烈變化,當(dāng)手松開(kāi)后AV值再次大步上升,證明池內(nèi)有氣泡但沒(méi)有排掉,當(dāng)手堵和松開(kāi)廢液管時(shí),AV值基本不變時(shí),證明排汽泡成功,再觀察基線將穩(wěn)定。
  四、池內(nèi)有氣泡,手堵廢液管,AV值劇烈變負(fù)的原因解釋?zhuān)貎?nèi)充滿(mǎn)空氣或液體時(shí),光透過(guò)率
  

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