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在一個波長，一個溶液的總吸光度是等于各個成分的吸光度的總和。根據(jù)這點就可分析混合物的各個組分。
如果有一種混合物，雖然是多組分，但組分吸收帶不相重迭。在某波長一種組分的吸收很大，而其它組分在此波長則無吸收。這樣就可在此波長采用上述的標準曲線法進行此組分的定量測定。
如果一個多組分混合物，其吸收帶雖然相互重迭，但能遵守比耳定律，則可以采用解聯(lián)立議程式的辦法來進行定量。如混合物中含有n個已知組分，則需在n個適當?shù)牟ㄩL進行n次組分各自在n個波長的摩爾吸光系數(shù)。波長的選擇應(yīng)注意使一個組分的吸光系數(shù)比其它組分的吸光系數(shù)大，這樣才能得到較高的度。
如果混合物中的幾個組分吸收帶相互重迭的并且不遵守比耳定律，便不能用解聯(lián)立方程式的辦法來解析。此時用分光光度法定量比較困難。Fry采用校正法把混合樣品中的五個組分配成不同的溶液，得到一系列校正曲線。在校正曲線的基礎(chǔ)上，解析得到了五組分的含量。但方法十分繁瑣，使用不便。
如果混合物中含有未知吸收帶的組分就更困難了。此時先用化學(xué)法分離純化。但也可直接利用分光光度法來分析。Morton利用有雜質(zhì)存在吸收光譜形狀的改變計算混合物中含有雜質(zhì)時魚肝油的量。雖然利用分光光度法可以作多組分分析，但方法比較繁瑣。
近年來，很多分光光度計設(shè)有多組分分析附件。借助于微處理機來分析計算混合物中多種組分的含量，十分簡便、迅速、準確。使得分光光度法在混合的定量分析中發(fā)揮更大的作用。同樣，也可用后面介紹的導(dǎo)數(shù)光譜法來定量。
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