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Poroshell 五大金剛之 CS-C18 改善堿性化合物峰形和容量

來(lái)源:安捷倫科技(中國(guó))有限公司   2024年11月27日 09:22  

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本研究使用甲酸和乙腈梯度對(duì)堿性藥物化合物進(jìn)行了分離。比較了兩種表面多孔顆粒填料 C18  色譜柱:表面帶電荷的 Agilent InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 和傳統(tǒng)的 C18 鍵合相色譜柱。使用簡(jiǎn)單且普遍適用的甲酸流動(dòng)相時(shí),這些堿性分析物在帶電荷表面色譜柱上獲得的峰形優(yōu)于傳統(tǒng) C18 柱。傳統(tǒng) C18 色譜柱需要使用不太理想的三氟乙酸流動(dòng)相來(lái)改善峰形。進(jìn)一步的研究表明,帶電荷表面色譜柱還提高了堿性分析物的載樣量,能夠改善雜質(zhì)分析的檢測(cè)限。

 

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Poroshell 120 CS-C18 色譜柱將表面多孔型雜化顆粒與表面電荷技術(shù)相結(jié)合,既保留了高效低壓的優(yōu)勢(shì),又能耐受廣泛的 pH 范圍,滿足 LC 和 LC/MS 方法開(kāi)發(fā)高效快速的需求。

 

系統(tǒng)配置

Agilent 1290 Infinity II 全能泵 (G7104A)

Agilent 1290 Infinity II 樣品瓶 進(jìn)樣器 (G7129B)

Agilent InfinityLab 液相色譜系列 集成式柱溫箱 (G7130A)

Agilent Ultivo LC/TQ (G6465A)

Agilent 1290 Infinity II 二極管 陣列檢測(cè)器 (G7117B)

 

UHPLC方法參數(shù)

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LC/TQ 采集方法參數(shù)

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結(jié)果與討論

使用六種化合物標(biāo)樣,比較了3 種分析條件下的性能。色譜圖顯示了使用簡(jiǎn)單的甲酸流動(dòng)相在 InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 色譜柱上獲得的 6 種堿性藥物化合物的分離情況。中間的色譜圖展示了使用相同流動(dòng)相時(shí)傳統(tǒng) C18 色譜柱的性能。相比表面帶電荷的 C18,傳統(tǒng) C18 色譜柱上獲得的峰更寬。底部色譜圖顯示,使用三氟乙酸流動(dòng)相可改善傳統(tǒng) C18 色譜柱的峰寬,如峰寬圖所示。由于三氟乙酸 pH 值極低,通常被認(rèn)為是不理想的流動(dòng)相。低 pH 值可能具有破壞性,且難以從色譜柱和 LC 系統(tǒng)中徹底清除。對(duì)于 LC/MS 用戶來(lái)說(shuō),由于三氟乙酸的離子 抑制作用,還會(huì)大幅降低信號(hào)強(qiáng)度。

 

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堿性藥物化合物的色譜性能比較

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清楚表明,表面帶電荷的 CS-C18 可使阿米替林始終保持較窄的峰形。即使在色譜 柱過(guò)載的情況下,其峰寬也始終比其他三 種傳統(tǒng) C18 色譜柱窄。

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中等載樣量和高載樣量下 CS-C18 于傳統(tǒng) C18 之間的性能差異

InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 色譜柱更低的過(guò)載效應(yīng)意味著其能在堿性化合物的雜質(zhì)分析中表現(xiàn)得更出色。在雜質(zhì)分析中,主要化合物的濃度通常較高,而其他目標(biāo)分析物的濃度較低。對(duì)雜質(zhì)含量為 0.25%(按重量計(jì))的高濃度阿米替林樣品的雜質(zhì)分析,隨載樣量增大,傳統(tǒng)的 C18 主峰大幅展寬,覆蓋了較早洗脫的雜質(zhì)峰,并且明顯的峰拖尾現(xiàn)象影響了晚洗脫的雜質(zhì)的峰形,而使用Poroshell 120 CS-C18 色譜柱時(shí),主峰仍保持較窄的峰寬,足以與其前后的雜質(zhì)峰分離。

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在 CS-C18 和傳統(tǒng) C18上對(duì)阿米替林 +0.25% 雜質(zhì)進(jìn)行雜質(zhì)分析

 


結(jié)論

在簡(jiǎn)單的甲酸流動(dòng)相條件下分析堿性分析物時(shí),表面帶電荷 Agilent InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 色譜柱比傳統(tǒng) C18 鍵合相具有更出色的性能。獲得的峰形更高且更尖銳,提供了更高的分離度和靈敏度。CS-C18 還提高了載樣量,并能保持出色的堿性化合物峰形,實(shí)現(xiàn)更靈敏的雜質(zhì)分析。


 

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