你是否也常常遇到這些超濾實驗的困擾?
流速太慢:離心機從晚上9點“肝”到凌晨2點半,快要崩潰!
濃縮失?。盒那樵愀猓肟?,不是在做實驗,就是在實驗失敗的路上。
過濾困難:離譜!PBS都濾不下來,嚴(yán)重耽誤我的實驗進(jìn)度……
濾膜堵塞:誰懂啊,給蛋白換液,堵了兩根超濾管還沒搞完,一天白干?
蛋白損失:離心完蛋白漏的干干凈凈,真的栓Q,難道是我的福報?
說多了都是淚,好想擁有一支能力強,效果拔群的超濾管!
別急,讓小賽來為你分憂解難。切記,在進(jìn)行樣品濃縮超濾之前,一定要做好正確的選型,并注意實驗操作規(guī)范哦!
如何避開一個個超濾實驗中的天坑,小賽準(zhǔn)備了20頁超長實用資料《實驗室過濾解決方案和實用工具合集》,涵蓋超濾選型和實用技巧,絕對是你實驗室的得力助手!快來免費下載吧!
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接下來,讓我們看看超濾管有哪些常見的疑難困惑吧!
Q
如何根據(jù)我的樣品體積,選擇對應(yīng)的超濾產(chǎn)品?
賽多利斯超濾產(chǎn)品家族,可實現(xiàn)從0.1mL-5L體積范圍樣品的超濾和透析,且可以使用離心,加壓,加壓離心,以及切向流過濾(TFF)的方式進(jìn)行樣品處理。
Q
不同的超濾方式有什么特點和區(qū)別呢?
Vivaspin® 超濾管
常用的是離心方式,過程溫和,方便快速,可為大多數(shù)樣品溶液提供濃縮過濾,用于純化和濃縮蛋白質(zhì)、核酸、病毒、大分子和納米顆粒等
Vivaspin® 20和Vivaspin® 100超濾杯
可以在氣體壓力下運行,Vivaspin® 20也可以通過加壓離心運行,兩者相結(jié)合的處理時間通常比離心快30 %到50 %
Vivaflow® 切向流過濾膜包
能夠快速處理大體積樣品,減少濾膜堵塞,有效回收目標(biāo)分子。可拓展性強,適用于濃縮、脫鹽、澄清和分離等多種操作
Q
超濾膜材質(zhì)多種多樣,都適合我的樣品嗎,我該如何進(jìn)行選擇呢?
小賽推薦4種膜材質(zhì),分別是聚醚砜(PES)、再生纖維素(RC)、改良的再生纖維素(Hydrosart® RC)和三醋酸纖維素(CTA)供大家選擇,如圖所示,快點擊打開看看它們各自的“看家本領(lǐng)”吧!
Q
我目前做的是XXX樣品,有對應(yīng)的超濾管供選擇嗎?
當(dāng)然啦!賽多利斯的膜材質(zhì)和孔徑十分齊全,在選型正確的前提下,可以確保任何生物分子的最大回收率哦!
Q
如何選擇最佳的截留分子量(MWCO)呢?
一般的選擇原則是1/3;如果優(yōu)先考慮截留率,可選擇更小MWCO,如1/6;
如果優(yōu)先考慮流速,可選擇更大MWCO,如1/2。注意,不同品牌的截留分子量MWCO略有差異,不可簡單照搬哦!
Q
我的樣品是核酸,如何把單位bp換算成對應(yīng)的截留分子量KDa呢?
MWCO截留分子量與nm納米 / bp值的換算關(guān)系如圖所示。
Q
超濾管使用過程中,對于離心機的擺放有什么要求?
超濾過程中,請注意離心力一定不要作用在膜上,水平轉(zhuǎn)子或角轉(zhuǎn)子的要求也不一樣哦,詳情請看圖示。
Q
使用不同超濾管時的離心力如何設(shè)置? 最大處理體積分別是多少?
做實驗時需要調(diào)整離心力在超濾膜的承受范圍內(nèi),如果轉(zhuǎn)速太高,可能導(dǎo)致膜破裂。建議在超濾管中加入樣品時不要超過最大體積,以Vivaspin® Turbo 15為例,若使用水平轉(zhuǎn)子,樣品不得超過15mL,若使用角轉(zhuǎn)子則不超過9mL。
另外,建議核酸樣品的離心力比蛋白樣品離心力低一半左右。而如果是線性分子,在低的離心力條件下可以獲得更好的濃縮效果哦!
讓我們一起告別超濾實驗的困擾,迎接更加順利的實驗之旅!
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