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細(xì)胞電轉(zhuǎn)參數(shù)的相關(guān)問題
是否每一個細(xì)胞都有特定的參數(shù)？
不是。即使是同一個細(xì)胞，電轉(zhuǎn)實際上也沒有單一的參數(shù)，需要根據(jù)實驗需要的細(xì)胞密度以及溫度和DNA情況加以預(yù)先測試。
另外，同樣的細(xì)胞在不同的實驗室培養(yǎng)條件下可能需要不同的參數(shù)，因此本網(wǎng)站有推薦參數(shù)供客戶參考。對于沒有推薦參數(shù)的細(xì)胞，可以選擇類似直徑的細(xì)胞參數(shù)進行測試。
為什么每次同樣的細(xì)胞進行電轉(zhuǎn)，有的時候結(jié)果不一樣？
很多客戶在剛剛接觸電轉(zhuǎn)實驗的時候都會遇到這個問題，因為影響電轉(zhuǎn)效果的因素有很多，比如：細(xì)胞密度、溫度、DNA質(zhì)量等。我們都會建議客戶在首次做一個新的細(xì)胞電轉(zhuǎn)時可以從推薦的參數(shù)出發(fā)來做個簡單GFP測試找到合適的參數(shù)。
初次實驗建議按照推薦電壓上下隔20V測試，盡量把預(yù)先測試的實驗條件控制得與正式實驗一致，比如測試的時候細(xì)胞密度、培養(yǎng)方式、質(zhì)粒用量等。另外，同樣的細(xì)胞在不同的實驗室培養(yǎng)條件下可能需要不同的參數(shù)，因此推薦參數(shù)僅供參考。通常GFP熒光在電轉(zhuǎn)1-3個小時后可通過顯微鏡進行觀察，過夜培養(yǎng)后熒光表達更強。
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