薄層色譜的基本原理你了解嗎
薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù),屬固―液吸附色譜,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn),一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時(shí),把吸附層加厚加大,因此,又可用來精制樣品,此法適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質(zhì)。此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機(jī)反應(yīng)及進(jìn)行柱色譜之前的一種“預(yù)試”。
薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑,待干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細(xì)管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點(diǎn)線上,晾干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi),浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂*約1cm附近時(shí),將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。
基本原理
色譜法的基本原理是利用混合物中各組分在某一物質(zhì)中的吸附或溶解性能的不同,或和其它親和作用性能的差異,使混合物的溶液流經(jīng)該種物質(zhì),進(jìn)行反復(fù)的吸附或分配等作用,從而將各組份分開。薄層色譜是一種微量、快速和簡(jiǎn)便的色譜方法。由于各種化合物的極性不同,吸附能力不相同,在展開劑上移動(dòng),進(jìn)行不同程度的解析,根據(jù)原點(diǎn)至主斑點(diǎn)中心及展開劑前沿的距離,計(jì)算比移值(Rf):
化合物的吸附能力與它們的極性成正比,具有較大極性的化合物吸附較強(qiáng),因此Rf值較小。在給定的條件下(吸附劑、展開劑、板層厚度等),化合物移動(dòng)的距離和展開劑移動(dòng)的距離之比是一定的,即Rf值是化合物的物理常數(shù),其大小只與化合物本身的結(jié)構(gòu)有關(guān),因此可以根據(jù)Rf值鑒別化合物。
薄層色譜可適用小量樣品(幾到幾十微克甚至0.01μg)的分離:也可用于多達(dá)500mg樣品的分離,是近代有機(jī)化學(xué)中用于定性,定量的一種重要手段。適用于那些揮發(fā)性小的化合物,以及在高溫下易發(fā)生化學(xué)變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。
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