倒置熒光顯微鏡是細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞轉(zhuǎn)染和很多生物研究中常用的儀器，相比共聚焦顯微鏡，倒置熒光顯微鏡的成像精度雖然稍低，但儀器更普及，更容易買(mǎi)到或者約到，而且使用維護(hù)都更簡(jiǎn)單點(diǎn)。今天我們就給大家分享下倒置熒光顯微鏡使用可能遇到的常見(jiàn)問(wèn)題，以及可能的解決辦法。

什么是倒置熒光顯微鏡

倒置熒光顯微鏡由倒置顯微鏡和落射熒光模塊組成，倒置顯微鏡是相對(duì)正置顯微鏡的概念，其物鏡、照明系統(tǒng)相對(duì)樣品的位置是顛倒的；落射熒光模塊是熒光觀(guān)察的核心部件，有轉(zhuǎn)盤(pán)式熒光模塊和集成熒光模塊兩種，轉(zhuǎn)盤(pán)式后期可升級(jí)，但需要獨(dú)立的熒光光源燈箱，用轉(zhuǎn)盤(pán)式模塊的倒置熒光顯微鏡更大、更重、更貴。

為什么要用倒置熒光顯微鏡

倒置熒光顯微鏡通常Z高只會(huì)配40X物鏡，因此放大倍率、分辨率不如正置熒光顯微鏡，但勝在應(yīng)用層面更方便好用。

一是、倒置熒光顯微鏡的物鏡有更長(zhǎng)工具距離，可以適配各種培養(yǎng)皿從底部直接成像，從而節(jié)省了反復(fù)制樣做玻片的麻煩，效率更高更適合大批量、多視野培養(yǎng)細(xì)胞等樣品的觀(guān)察。

二是、倒置熒光顯微鏡可以無(wú)沾染觀(guān)察，無(wú)沾染意思是因?yàn)橛^(guān)察無(wú)需打開(kāi)培養(yǎng)皿，可避免取樣制樣帶來(lái)的沾染污染風(fēng)險(xiǎn)。

三是、倒置熒光顯微鏡的優(yōu)勢(shì)是更大的工作空間，因?yàn)榈怪脽晒怙@微的明場(chǎng)照明系統(tǒng)采用的是長(zhǎng)工作距離聚光鏡，因此載物臺(tái)上方有更大空間，更方便安裝使用顯微操作系統(tǒng)等配件。

倒置熒光顯微鏡通常可以實(shí)現(xiàn)明場(chǎng)、相襯和熒光觀(guān)察，如果儀器附近有貼SOP或者說(shuō)明書(shū)，可以看看，快速上手。明場(chǎng)觀(guān)察很簡(jiǎn)單，可以看病理切片等樣品，這里不贅述；相襯觀(guān)察需要切換到相襯物鏡，然后把上光源光強(qiáng)調(diào)高，聚光鏡光闌調(diào)到PHP位置（最大位置），切換相襯環(huán)板到對(duì)應(yīng)的位置即可；難點(diǎn)是熒光觀(guān)察，不同倒置熒光顯微鏡有不同結(jié)構(gòu)，大致可以分為研究級(jí)倒置熒光顯微鏡和新型倒置熒光顯微鏡兩種。