研域生物大鼠原代腎足細(xì)胞實(shí)驗(yàn)過程詳細(xì)介紹如下:
1. 用無菌器械取出胚胎,放在無菌的培養(yǎng)皿中。
2. 取下胚胎的頭,放在盛有4ml不含 Ca2+和Mg2+的平衡鹽溶液(BSS)的培養(yǎng)皿中。
3. 從頭顱骨上取下,放在35mm培養(yǎng)皿中的BSS液滴上,培養(yǎng)皿中半裝滿 Paraplast(Sigma)。
4. 在顯微鏡下剝離腦膜,取下海馬體,放在裝有BSS的 35 mm 培養(yǎng)皿中。
5. 海馬體在新鮮配制的 0.25% 胰酶BSS溶液中37℃ 孵育15分鐘。
6. 小心吸掉胰酶溶液,加入5mlBSS,層流柜中室溫放置5分鐘。重復(fù)此步兩次或更多次,最后加入2mlBSS。
7. 首先用普通巴斯德吸管分離細(xì)胞,然后換用一支用火燒平、內(nèi)徑縮小一半的吸管。
8. 計(jì)數(shù)細(xì)胞,確定細(xì)胞密度。
9. 所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮于接種培養(yǎng)基中,接種培養(yǎng)皿中poly-L-lysine 預(yù)處理的蓋玻片。如果用于生化實(shí)驗(yàn),細(xì)胞直接接種 poly-L-lysine 處理的培養(yǎng)皿。
10. 2~4 小時(shí)后,蓋玻片轉(zhuǎn)移至含有單層神經(jīng)膠質(zhì)的培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)皿中是維持培養(yǎng)基。
11. 每周更換3ml培養(yǎng)液。
上海研域?qū)崢I(yè)有限公司是一家科研和銷售科學(xué)試劑產(chǎn)品,領(lǐng)域涵蓋化學(xué)、分析化學(xué)、生命科學(xué)和材料科學(xué)等基礎(chǔ)創(chuàng)新領(lǐng)域,助力客戶的研究計(jì)劃。公司產(chǎn)品有ELISA試劑盒、大鼠原代腎足細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)、各類生化試劑、金標(biāo)檢測試劑盒、食品檢測試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、胎牛血清、科研抗體、生物耗材等。
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