一、什么是細(xì)胞系

初代培養(yǎng)物開(kāi)始次傳代培養(yǎng)后的細(xì)胞，即稱(chēng)之為細(xì)胞系。如細(xì)胞系的生存期有限，則稱(chēng)之為有限細(xì)胞系（Finite Cell Line）；已獲無(wú)限繁殖能力能持續(xù)生存的細(xì)胞系，稱(chēng)連續(xù)細(xì)胞系或無(wú)限細(xì)胞系 （ I n f i n i t e C e l l L i n e ） 。

二、介紹

細(xì)胞系缺少系統(tǒng)命名的標(biāo)準(zhǔn)，導(dǎo)致了細(xì)胞系的錯(cuò)誤鑒定，交叉污染以及缺乏注釋等問(wèn)題。

三、細(xì)胞生物學(xué)研究狀況

細(xì)胞系作為正常或腫瘤組織的模式細(xì)胞被廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究和藥物開(kāi)發(fā)，然而很大一部分的細(xì)胞系被錯(cuò)誤標(biāo)記或被其它個(gè)體、組織、種系來(lái)源的細(xì)胞所替代 。

在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域，文章一直在發(fā)表，科研成果一直在公布，但是當(dāng)中哺乳動(dòng)物細(xì)胞被錯(cuò)誤鑒定，存在交叉污染的情況也同時(shí)存在著。

2010年《國(guó)際癌癥雜志》（IJC）統(tǒng)計(jì)出一列表，在346篇文章中，有 103篇存在細(xì)胞被

Hela細(xì)胞污染的情況。

建立的大鼠（rat）視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)的細(xì)胞系，命名為RGC-5。在隨后的十幾年時(shí)間里，至少230篇論文的研究與假設(shè)是建立在這株細(xì)胞系上。結(jié)果在2009年，序列測(cè)定結(jié)果表明，RGC-5是一株小鼠（mouse）細(xì)胞。

四、細(xì)胞系交叉污染

五、細(xì)胞交叉污染來(lái)源

1. 通過(guò)其他實(shí)驗(yàn)室饋贈(zèng)獲得細(xì)胞系

2. 細(xì)胞系的長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)培養(yǎng)

3. 使用滋養(yǎng)層細(xì)胞

4. 培養(yǎng)瓶的錯(cuò)誤標(biāo)記

5. 同時(shí)操作多種細(xì)胞系

6. 多種細(xì)胞系公共使用同一培養(yǎng)基

7. CO2培養(yǎng)箱

細(xì)胞錯(cuò)誤鑒定的后果

1. 細(xì)胞系的損失

2. 時(shí)間和金錢(qián)的損失

3. 在公眾領(lǐng)域（文獻(xiàn)等）提供錯(cuò)誤信息

4. 造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果不一致或不可重復(fù)

5. 個(gè)人：尷尬；公眾：羞辱

如何減少細(xì)胞系交叉污染

1. 從信譽(yù)良好的組織或機(jī)構(gòu)獲得細(xì)胞系

2. 良好的文檔編制方法

3. 訓(xùn)練有素的技術(shù)操作員

4. 每種細(xì)胞系單獨(dú)使用培養(yǎng)基

5. 溶液或試劑分裝使用

6.常規(guī)性地注意細(xì)胞系身份以及其特性是否發(fā)生污染

7.早期做好充足的凍存儲(chǔ)備

8.細(xì)胞培養(yǎng)代數(shù)不要太高

何時(shí)需做細(xì)胞系鑒定

1、發(fā)表文章或申請(qǐng)課題經(jīng)費(fèi)前；

2、使用細(xì)胞進(jìn)行臨床治療（試驗(yàn)）前；

3、準(zhǔn)備凍存保種或已凍存多年的細(xì)胞；

4、一個(gè)涉及到細(xì)胞試驗(yàn)項(xiàng)目開(kāi)始/結(jié)束時(shí)；

5、新得到的細(xì)胞或?qū)嶒?yàn)室培養(yǎng)5代以上的細(xì)胞；

6、細(xì)胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大；

已開(kāi)始要求細(xì)胞系鑒定的期刊

Cell

Nature;

Bio Techniques;

Cancer Research;

Cancer Discovery;

Clinical Cancer Research;

Molecular Cancer Research;

Cancer Prevention Research;

International Journal of Cancer;

Molecular Cancer Therapeutics;

Cell Biochemistry and Biophysics;

Cancer Epidemiology, Biomarkers & Prevention;

In Vitro Cellular & Developmental Biology – Animal

六、細(xì)胞系的鑒定方法

1）鑒定細(xì)胞的種系來(lái)源：常用方法主要有染色體分析、同工酶分析（乳酸脫氫酶，嘌呤核苷磷酸化酶，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶，蘋(píng)果酸脫氫酶等）、DNA指紋圖譜等技術(shù)。

2）鑒定細(xì)胞的組織來(lái)源：可通過(guò)形態(tài)學(xué)手段（上皮細(xì)胞樣 ，成纖維細(xì)胞樣 ，淋巴母細(xì)胞樣等 ）、檢測(cè)組織特異性抗原等進(jìn)行鑒定。

3）細(xì)胞是否發(fā)生轉(zhuǎn)化和惡變：主要通過(guò)核型分析、細(xì)胞生長(zhǎng)行為觀 察（是否喪失接觸抑制）等進(jìn)行鑒定。

4）細(xì)胞有無(wú)發(fā)生交叉污染：主要通過(guò)同工酶及DNA指紋圖譜技術(shù)進(jìn)行鑒定。

七、不同細(xì)胞鑒定技術(shù)比較細(xì)胞系鑒定與STR

STR（Short TandemRepeat，短串聯(lián)重復(fù)序列）基因分型已被ICLAC、ATCC等機(jī)構(gòu)作為金標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于細(xì)胞鑒定 。

細(xì)胞STR數(shù)據(jù)庫(kù)

美國(guó)的ATCC 細(xì)胞庫(kù)

德國(guó)的DSMZ細(xì)胞庫(kù)

日本的RIKEN細(xì)胞庫(kù)

日本的JCRB細(xì)胞庫(kù)

STR位點(diǎn)數(shù)分辨率比較

細(xì)胞系鑒定服務(wù)

為了進(jìn)一步提高鑒定的分辨率，除了包含ATCC檢測(cè)的8個(gè)STR和1個(gè)性別決定位點(diǎn)Amelogenin外，另新增了11個(gè)高度多態(tài)性位點(diǎn) ，共檢測(cè)20個(gè)STR位點(diǎn)。