細(xì)胞粘附分子ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理
細(xì)胞粘附分子ELISA檢測(cè)試劑盒是一種用于檢測(cè)細(xì)胞表面粘附分子水平的實(shí)驗(yàn)工具。其原理主要包括以下幾個(gè)步驟:
樣本處理:將待測(cè)樣本(如細(xì)胞上清液、組織提取物等)加入已經(jīng)涂有特定抗體的微孔板中,使樣本中的目標(biāo)分子與固相抗體發(fā)生特異性結(jié)合。
洗滌:洗去未結(jié)合的雜質(zhì)和非特異性結(jié)合物,以保證后續(xù)步驟的準(zhǔn)確性。
二級(jí)抗體結(jié)合:添加與待測(cè)目標(biāo)分子不同表位上標(biāo)記有酶(如辣根過(guò)氧化物酶-HRP)的次級(jí)抗體。該次級(jí)抗體可以識(shí)別并結(jié)合到待測(cè)目標(biāo)分子上。
再次洗滌:洗去未結(jié)合的二級(jí)抗體。
底物反應(yīng):向孔內(nèi)加入適當(dāng)?shù)孜?,使酶催化產(chǎn)生可量化信號(hào)。通常使用底物TMB(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)來(lái)生成一個(gè)可見(jiàn)的藍(lán)色產(chǎn)物。
反應(yīng)停止:通過(guò)添加停止溶液(如硫酸或鹽酸)停止底物反應(yīng),產(chǎn)生的藍(lán)色產(chǎn)物轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。
讀取結(jié)果:使用酶標(biāo)儀檢測(cè)光密度值(OD值),其與待測(cè)樣本中目標(biāo)分子的含量呈正相關(guān)關(guān)系。通常將待測(cè)樣本的OD值與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較,從而確定目標(biāo)分子的濃度。
細(xì)胞粘附分子ELISA檢測(cè)試劑盒通過(guò)這一原理,可以快速、準(zhǔn)確地定量分析細(xì)胞表面粘附分子的水平,并在許多實(shí)驗(yàn)和研究領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用,如腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、神經(jīng)科學(xué)等。
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