血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400轉(zhuǎn)/分離心1-2分鐘,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。最好不使用過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。在解凍血清時,建議隨時將血清搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
為什么有時血清中出現(xiàn)絮狀沉淀?是否需要去除?如何去除?
多種原因可能導致絮狀沉淀的形成,常見的原因之一是融化過程中,脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會影響產(chǎn)品質(zhì)量。可以400g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。
為什么存放于冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀?如何避免該現(xiàn)象?
在2-8°C條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時處于溶解狀態(tài),在凍融過程中會發(fā)生聚集,形成肉眼可見的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會影響血清的性能??梢?00g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象,建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反復凍融和融化后的血清在2-8°C條件下長時間放置。
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