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高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設(shè)備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。
工作時儲液器中的流動相被高壓泵壓入檢測系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進樣器進入色譜系統(tǒng)，被流動相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對運動時，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，在其通過檢測器時，被轉(zhuǎn)換成信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式輸出。
高效液相色譜儀的柱壓是否穩(wěn)定與色譜圖峰形好壞、分離效果、保留時間等有著密切關(guān)聯(lián)。以下是常見的幾種柱壓問題及解決方法：
(1)柱壓升高
①色譜柱被堵塞，解決方法更換新的色譜柱；
②系統(tǒng)壓力零點飄移，解決方法:調(diào)節(jié)壓力傳感器的零點；
③阻尼器堵塞，解決方法:拆下后進行超聲波清洗或更換新的阻尼器；
④進樣器、管路或連接口堵塞，解決方法:參見說明書進行清洗。
(2)柱壓降低:
①無流動相流出，解決方法:檢查貯液瓶中有無流動相、沉子是否浸沒在流動相中、泵是否運行；
②系統(tǒng)存在漏液，解決方法:檢查各部件的連接點，進行再次固定；
③參比閥未關(guān)閉，解決方法將流速降低后關(guān)閉參比閥。
(3)柱壓不穩(wěn)
①系統(tǒng)管路中存在氣泡，解決方法重新進行排氣操作；
②沉子表面的小孔被堵，解決方法:將沉子取下后進行超聲波清洗。
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