酶的分離純化一般包括三個(gè)基本步驟:即抽提、純化、結(jié)晶或制劑。
首先將所需的酶從原料中引入溶液,此時(shí)不可避免地夾帶著一些雜質(zhì),然后再將此酶從溶液中選擇性地分離出來,或者從此溶液中選擇性地除去雜質(zhì),然后制成純化的酶制劑。
酶分離純化的最終目的是獲得單一純凈的酶,因此,容許在不破壞“目的酶”的限度內(nèi),使用各種手段;酶與底物和抑制劑的結(jié)合常使其理化性質(zhì)和穩(wěn)定性發(fā)生改變,這種特性已被用于酶的分離純化。
由于酶及其來源的多樣性及與之共存的高分子物質(zhì)的復(fù)雜性,目前還很難找到一種通用的方法以適用于一切酶的純化。為了使一種酶達(dá)到高度純化,往往需要多種方法協(xié)同作用,通過酶活性的跟蹤檢測確定*佳流程。
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