胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時,將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可較大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產(chǎn)量低,成本高。
胎牛血清應(yīng)用在哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)中;因此,胎牛血清應(yīng)用很廣泛。比如,胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。
真正胎牛血清的生產(chǎn)工藝流程有哪些呢?
胎牛血清主要步驟:
1.固定和麻醉
胎牛原血清采集的關(guān)鍵技術(shù)主要是懷孕母牛的剖腹產(chǎn)和太牛的全封閉無菌心臟穿刺采血,對懷孕8個月左右的母牛進(jìn)行剖腹產(chǎn),產(chǎn)前采用側(cè)臥保定方法固定。麻醉采取全身麻醉和術(shù)部局部麻醉相結(jié)合的方法,確實有效的麻醉師順利進(jìn)行剖腹產(chǎn)的重要保障。
2.母牛剖腹,心臟穿刺
手術(shù)切口位置選擇在左肷窩腹壁的上三分之一處,優(yōu)點是靠近子宮角便于手術(shù)中縫合快速收縮的子宮,其次是內(nèi)容物不易流入腹腔,減少腹腔被污染而帶來腹,盆兩腔感染引發(fā)生殖系統(tǒng)器質(zhì)性病變的風(fēng)險。因子宮收縮極快,故在胎牛取出的同時要快速縫合,然后進(jìn)行心臟穿刺采血。
3.原血采集
采血前器具全部消毒,探明胎牛心臟搏動明顯部位,消毒后針管垂直穿刺心臟采血。
4.冷凍離心
將原血盡快放入冷凍離心機(jī)中3400r/min ,30min。收集血清,凍存。
5. 成品生產(chǎn)和定級
首先做好原血清解凍工作,26℃熱風(fēng)均勻循環(huán)解凍然后0.1μm三次過濾,避免病原微生物的污染。此過程會對血清檢測和定級。全程在萬級到十萬級凈化車間完成。全程做好記錄,包括母牛資料,生產(chǎn)過程記錄和每只胎牛血清數(shù)量 以及容器編號。方便檢測和血清溯源。
6. 分裝貼標(biāo)保存
成品血清分裝貼標(biāo)后需迅速儲存在-20℃以下快速冷凍24小時以上。
胎牛血清為制品,不含任何人為的添加成分,可應(yīng)用于各種常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng),特別適合于一些要求較高的細(xì)胞的培養(yǎng),為細(xì)胞提供必須的營養(yǎng)物質(zhì)和多種生長因子,有效促進(jìn)細(xì)胞生長。
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。市場上出現(xiàn)各類牛血清,索萊寶教大家怎么根據(jù)不同細(xì)胞選擇胎牛血清。小牛血清,新生牛血清,胎牛血清三者的成分基本沒區(qū)別,三者是依據(jù)采集的牛齡的不同來命名。胎牛是還未接觸外界世界的母牛體內(nèi)的牛,所以胎牛血清的免疫球蛋白含量應(yīng)該是極少的,血清比較純,培養(yǎng)細(xì)胞的效果較佳。依次是新生牛,再次是小牛。
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