723分光光度計是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜,來研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。分光光度計可在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。
暗電流是光電檢測器的一種特殊產(chǎn)物,無論是光電管(電子流)還是硅光二極管(價電子移動)只要處于通電狀態(tài)均會產(chǎn)生暗電流;嚴(yán)格意義上講,由于分光光度計的光信號檢測系統(tǒng)(光電轉(zhuǎn)換器)不僅有光電檢測器同時還包括放大電路,因此放大系統(tǒng)對暗電流的大小、漂移及噪聲的影響也不可小視。
723分光光度計暗電流對分析結(jié)果的影響:
對于分光光度計假如被測樣品的透過(或反射)光信號到達(dá)光電檢測器后與檢測器本身的暗電流信號疊加在一起被放大處理,其測試結(jié)果的可信度和真實性就會大打折扣;實踐證實,尤其在雙光束雙檢測器類型的儀器上,假如不進(jìn)行暗電流的校正,有時結(jié)果值與真實值相差甚遠(yuǎn)。
分光光度計的暗電流校正與樣品背景扣除的熟悉誤區(qū):
在分光光度計的應(yīng)用上,人們早已熟悉到樣品背景對分析結(jié)果的影響,為了得到真實的光譜(校正光譜)雙光束分光光度計儀器應(yīng)運(yùn)而生。使用者在測定前在兩個通道上均放進(jìn)空缺液或參比液,在單波長方式下僅按調(diào)零鍵即可,假如是做波長掃描則要做基線記憶或稱為基線校正,其目的就是做背景扣除。但有些儀器使用者對暗電流校正往往忽略或不了解甚至誤將背景校正看做為就是暗電流校正。
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