皮膚致敏試驗(yàn)替代法ADRA，無需使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，即可檢測化學(xué)物質(zhì)對皮膚是否會(huì)造成過敏反應(yīng)。

　　現(xiàn)其適用范圍得到擴(kuò)大，其檢測混合物的方法已收錄于OECD測試準(zhǔn)則，可用于評估化妝品、洗滌劑或消毒劑等各領(lǐng)域產(chǎn)品中使用的天然提取物等的安全性。

富士膠片株式會(huì)社（總部：東京都港區(qū)，總裁兼董事?CEO：后藤禎一）非常高興地通知廣大客戶，無需使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，即可檢測化學(xué)物質(zhì)對皮膚有無過敏反應(yīng)的皮膚致敏試驗(yàn)ADRA（Amino acid Derivative Reactivity Assay）已作為混合物^※1的皮膚致敏試驗(yàn)方法收錄于OECD（經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織）測試準(zhǔn)則^※2。此次收錄,“ADRA“可評測物質(zhì)（被測物質(zhì)）不再是單一物質(zhì)，還能檢測混合物，并且有效性驗(yàn)證測試中也確認(rèn)了*的再現(xiàn)性。作為國際上可靠的檢測方法被OECD認(rèn)可，對普及"ADRA "法產(chǎn)生了重要推動(dòng)力。

皮膚致敏測試是為了調(diào)查皮膚與化學(xué)物質(zhì)接觸時(shí)，引發(fā)的過敏反應(yīng)誘導(dǎo)的炎癥（皮疹）發(fā)生的皮膚致敏性。該測試用于產(chǎn)品規(guī)劃和生產(chǎn)前，評估新開發(fā)的化學(xué)物質(zhì)和使用化合物的安全性。近年來，因人們健康意識的提高，開始廣泛運(yùn)用天然提取物開發(fā)化妝品和洗滌劑等產(chǎn)品，所以需要可評估混合物皮膚致敏性的測試方法。“ADRA”在皮膚致敏性發(fā)生過程^※3之一的“化學(xué)物質(zhì)和蛋白的結(jié)合”，作為混合物測試方法收錄于OECD測試準(zhǔn)則，可滿足上述需求。

FUJIFILM運(yùn)用化學(xué)合成和分子設(shè)計(jì)的經(jīng)驗(yàn)生產(chǎn)的高靈敏度反應(yīng)試劑，于2017年開發(fā)了高精度的可評估化學(xué)物質(zhì)皮膚致敏性的皮膚致敏試驗(yàn)“ADRA”。2019年，“ADRA”作為檢測單一物質(zhì)的皮膚致敏性測試法收錄于OECD測試準(zhǔn)則。之后，F(xiàn)UJIFILM在不斷改良“ADRA”測試法的同時(shí)，還致力于開發(fā)針對混合物的皮膚致敏試驗(yàn)。

FUJIFILM通過更改常規(guī)“ADRA”的檢測方法實(shí)現(xiàn)了混合物的皮膚致敏性評估。具體變更有以下兩項(xiàng)，①反應(yīng)試劑與被測樣品混合時(shí)，被測樣品制備的方法從以往的摩爾濃度^※4變更為質(zhì)量濃度^※5，②除了吸光檢測儀^※6以外，還使用熒光檢測儀^※7作為檢測反應(yīng)進(jìn)行的分析儀器，根據(jù)不同的樣品使用不同的檢測儀器可高精度檢測多種混合物的皮膚致敏性。

此外，在同一實(shí)驗(yàn)室和不同實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行的再現(xiàn)性測試^※8結(jié)果顯示，實(shí)現(xiàn)了*再現(xiàn)性。以此作為有效性驗(yàn)證測試，收錄于OECD。

現(xiàn)在，FUJIFILM為普及開發(fā)的”ADRA”法，由富士膠片和光純藥公司推出了能簡單操作的“ADRA試劑盒”（2018年9月發(fā)售），以及使用相同試劑盒評估皮膚致敏性的委托服務(wù)（2022年4月開始）。未來，針對天然提取物的皮膚致敏試驗(yàn)，如化妝品、洗滌劑和消毒劑中使用的植物提取物等混合物，FUJIFILM將積極向化妝品公司、化工產(chǎn)品廠家和檢驗(yàn)委托機(jī)構(gòu)推廣“ADRA”，以進(jìn)一步普及該測試法。

“確保產(chǎn)品和化學(xué)物質(zhì)的安全”是FUJIFILM 2030年度目標(biāo)CSR計(jì)劃“可持續(xù)發(fā)展的價(jià)值計(jì)劃 2030”的一項(xiàng)重要課題。今后，我們將繼續(xù)通過開發(fā)化學(xué)物質(zhì)安的全性評估技術(shù)，為降低化學(xué)物質(zhì)對環(huán)境和健康的危害作出貢獻(xiàn)。

　　※1　由多種成分組成的化學(xué)物質(zhì)。

　　※2　OECD是以國際標(biāo)準(zhǔn)化評估化學(xué)物質(zhì)特性和安全性的測試方法為目的的準(zhǔn)則。

　　※3　引起皮膚致敏的過程有三種，分別為“化學(xué)物質(zhì)與蛋白的結(jié)合”，“皮膚細(xì)胞響應(yīng)”，“樹狀細(xì)胞響應(yīng)”。

　　※4　溶液濃度的表示方法之一。目標(biāo)物質(zhì)溶解在1 L溶液中的物質(zhì)的量。

　　※5　溶液濃度的表示方法之一。目標(biāo)物質(zhì)溶解在1 L溶液中的重量。

　　※6　通過紫外線的照射，檢測吸收190 nm~900 nm波長的光的物質(zhì)以及該物質(zhì)吸光度的儀器。

　　※7　通過照射特定波長的光，檢測發(fā)出220nm~900nm波長的光的物質(zhì)以及該物質(zhì)熒光強(qiáng)度的儀器。

　　※8　實(shí)驗(yàn)室內(nèi)再現(xiàn)性測試是驗(yàn)證在同一實(shí)驗(yàn)室中更改測試條件（測試時(shí)間，測試人員等）進(jìn)行相同的測試，驗(yàn)證能否獲得相同測試結(jié)果的測

　　　　 試。實(shí)驗(yàn)室間再現(xiàn)性測試是指在多個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)室使用相同的測試條件，驗(yàn)證能否獲得相同測試結(jié)果的測試。

◆皮膚致敏試驗(yàn)替代法ADRA

以往的ADRA使用方法

●　使用FUJIFILM開發(fā)的高靈敏度檢測反應(yīng)試劑（以下，ADRA試劑）進(jìn)行的代替性皮膚致敏試驗(yàn)。無需使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，即可評估化學(xué)物質(zhì)對皮膚有無過

　  敏反應(yīng)。ADRA試劑含有萘環(huán)的氨基酸衍生物的分子結(jié)構(gòu)，因此可通過紫外光高靈敏度檢測。

●　評估單一物質(zhì)的皮膚致敏性時(shí)，制備ADRA試劑和被測樣品摩爾濃度比恒定的反應(yīng)溶液，使用高效液相色譜儀（HPLC）的吸收檢測器檢測未與被測樣

　  品結(jié)合的ADRA試劑的量。由于可高靈敏度檢測，與傳統(tǒng)方法“直接多肽反應(yīng)試驗(yàn)（DPRA）”^※9相比，可檢測約1/100量的被測樣品。

為使用ADRA法評估混合物的皮膚致敏性而對常規(guī)檢測方法作出的改變

①　變更為質(zhì)量濃度

　　由于天然提取物的成分往往不明，無法計(jì)算被測物質(zhì)的摩爾濃度，所以FUJIFILM尋找合適的質(zhì)量濃度（0.5mg/mL），變更被測樣品的制備方法為

　　質(zhì)量濃度。

②　有效運(yùn)用熒光檢測儀

　　以往使用的吸收檢測儀，可能會(huì)無法正確檢測和定量沒有與樣品結(jié)合的ADRA試劑的量，因此在使用ADRA試劑時(shí)，可有效運(yùn)用HPLC的熒光檢測儀

　　檢測會(huì)發(fā)出熒光的萘環(huán)。若使用光度檢測儀無法正確檢測和定量的被測物質(zhì)，可在使用吸收檢測儀的基礎(chǔ)上使用熒光檢測儀。

　　上述兩點(diǎn)的變更，可檢測混合物以及無法與被測樣品結(jié)合的ADRA試劑量。

　　為驗(yàn)證檢測方法變更所獲得的測試結(jié)果的有效性，于2019年10月~2020年12月進(jìn)行了再現(xiàn)性測試。在五個(gè)實(shí)驗(yàn)室中對10種化合物各進(jìn)行了三次評估，調(diào)查在同一實(shí)驗(yàn)室和不同實(shí)驗(yàn)室之間是否可以獲得相同的測試結(jié)果，結(jié)果證明為*的再現(xiàn)性。

　　※9　肽與化學(xué)物質(zhì)反應(yīng)后，通過HPLC檢測結(jié)合的殘留肽來評估皮膚致敏性的方法。

◆相關(guān)產(chǎn)品

　　ADRA試劑盒