PBS是磷酸緩沖鹽溶液一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na ?HPO ? 、KH?PO ? 、NaCl和KCl。PBS緩沖液不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。
由于Na?HPO ? 和KH?PO ? 它們有二級(jí)解離,緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1 mmol/L CaCl?和0.5 mmol/L MgCl?,以提供雙價(jià)陽(yáng)離子。
pbs緩沖液的配制方法
含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱為PBS-T)配制方法為:
稱取磷酸/二氫鉀(KH2PO4),磷酸/氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯/化鈉(NaCl),氯/化鉀(KCl),吐溫-20 ,加水。
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS 1L配方pH7.4:磷酸/二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
磷酸/氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
氯/化鈉(NaCl):8g,
氯/化鉀(KCl)0.2g,
加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,最后定容到1L
pbs緩沖液的作用
PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡(jiǎn)稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。
原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是首/選。
PBS也不是萬能的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持最佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性。
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