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反相填料常是以硅膠為基礎(chǔ)，表面鍵合有極性相對較弱的官能團(tuán)的鍵合相。 反相色譜所使用的流動相極性較強(qiáng)，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。 樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合先被沖出，而極性弱的組份會在色譜柱上有 更強(qiáng)的保留。 常用的反相填料有YMC C18填料(ODS)，C8(MOS)，C4(B)，C6H5(Phenyl)等。
聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要優(yōu)點是在PH值為1～ 14均可使用。 相對與硅膠基質(zhì)的YMC C18填料，這類填料具有更強(qiáng)的疏水性;大孔的聚合物填料對蛋白 質(zhì)等樣品的分離非常有效。 現(xiàn)在的聚合物填料的缺點是相對硅膠基質(zhì)填料，色譜柱柱效較低。
反相填料的較大特性是具有非常高的表面鍵合覆蓋率，是不同性質(zhì)有機(jī)化合物分離的理想選擇。通過在生產(chǎn)過程中的嚴(yán)格控制，使之*封尾，對酸性和堿性以及螯合物樣品具有*的分離性能。反相填料采用自主開發(fā)的球形多孔硅膠生產(chǎn)工藝，并對硅膠的硅烷化反應(yīng)進(jìn)行了系統(tǒng)研究，建立起了制備球形液相反相填料的優(yōu)化條件。所生產(chǎn)的球形多孔硅膠具有粒徑分布均勻，孔徑分布范圍窄，比表面積可控，表面官能團(tuán)濃度高和機(jī)械強(qiáng)度高等特點，完滿足現(xiàn)代液相色譜的要求。
反相填料在干燥狀態(tài)下為透明無孔凝膠，但是通過有機(jī)溶劑溶脹后可以變成具有分子篩性能的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，凝膠填料*溶脹后，孔徑和排阻極限由交聯(lián)度和洗脫劑決定。可以在苯、甲苯、二甲苯、二氯甲烷、四氯化碳、二甲基甲酰胺酮及混合有機(jī)溶劑中溶脹分離?？捎糜谟H脂性多聚物和有機(jī)洗脫溶質(zhì)的分子量、結(jié)構(gòu)類似物體積排阻層析，也可以分析分子體積不同、具有相同化學(xué)性質(zhì)的高分子同系物。
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