血清使用中常見問題
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      胎牛血清、新生牛血清、小牛血清有何區(qū)別？
胎牛血清：指健康母牛正常分娩前采集胎牛血液加工而成的血清，其胎球蛋白較多，血清白蛋白含量高，而r-球蛋白含量極低甚至沒有，并富含多種生長因子，是培養(yǎng)細(xì)胞zuiyou質(zhì)的血清。

新生牛血清：指健康母牛正常分娩后不久采集加工而成的血清，其內(nèi)含多種生長因子。

小牛血清：指出生后飼養(yǎng)一定時(shí)間（一周至六個月）再采集加工而成的血清，因與外界接觸時(shí)間過長，故血清內(nèi)r-球蛋白含量較高，不利于細(xì)胞培養(yǎng)，特別是不利于病毒研究與疫苗生產(chǎn)。

1、 如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損？

將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。  

長時(shí)間儲存在2－8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復(fù)凍融。建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí)，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

2、血清中包含絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理？

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清（400g，1-2分鐘）或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里（一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃氯麨V膜而無法過濾）。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失。

3. 為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞，昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。

4. 有必要做熱滅活嗎?

實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或*沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增

5. 為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀?

GIBICO的胎牛血清 沒有預(yù)老化，儲存在2－8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在－20℃儲存胎牛血清，避免反復(fù)凍融。

6. 如何避免沉淀物的產(chǎn)生?

解凍血清時(shí)，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

解凍血清時(shí)，請隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。 若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。

7、細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成？

（1）盡可能地減少血清凍融次數(shù)；

（2）培養(yǎng)基無需37℃水浴；

（3）培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0-7.2；  

（4）嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗；  

（5）掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長過老。

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